[发明专利]一种反复膨胀过程实现大块组织体的膨胀透明方法

摘要

本发明公开了一种对大块组织体多次进行低温浸泡、聚合以及膨胀的反复膨胀透明化方法，低温浸泡用于实现聚合单体和交联剂在组织体内的有效渗透；聚合用于形成可支撑组织体的交联网络；膨胀过程用于实现组织体的胀大；通过依次进行浸泡、聚合以及膨胀实现组织体的一次膨胀，然后重复这个过程实现二次、三次…，直至第n次膨胀后实现大块组织体的膨胀透明。采用本发明的反复膨胀实现大块组织体的膨胀透明化方法可以实现大块组织体的膨胀透明化，且组织碎裂程度小，这项技术有助于将膨胀显微镜方法用于大块组织体的神经网络结构的研究。

主权项

1.一种反复膨胀实现大块组织体的膨胀透明化方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)对组织体依次实施渗透、聚合以及膨胀,实现所述组织体的一次膨胀透明化；所述渗透过程通过在含有包埋单体和交联剂的浸泡母液中浸泡完成；(2)重复步骤(1)，并调整所述包埋单体的浓度，增大所述交联剂的浓度，直至所述组织体实现膨胀透明化；步骤(2)所述调整包埋单体的浓度的具体方法为：控制所述包埋单体的总浓度不变，调整包埋单体的浓度比例，使得包埋单体丙烯酸钠与丙烯酰胺的浓度比随着膨胀次数的增加而逐渐减小。