[发明专利]潜伏感染的鲤疱疹病毒3型DNA的提取方法、套式PCR检测方法及其试剂盒在审
| 申请号： | 201710077286.7 | 申请日： | 2017-02-14 |
| 公开（公告）号： | CN106801049A | 公开（公告）日： | 2017-06-06 |
| 发明（设计）人： | 王庆;郑树城;李莹莹;曾伟伟;王英英;刘春;任燕;石存斌;吴杰兴 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 佛山帮专知识产权代理事务所(普通合伙)44387 | 代理人： | 胡丽琴 |
| 地址： | 510000 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种潜伏感染的鲤疱疹病毒3型DNA的提取方法、套式PCR检测方法及其试剂盒。通过对无临床症状潜伏感染的鲤或锦鲤进行外周淋巴细胞分离，提取淋巴细胞的DNA，然后对这类DNA进行套式PCR检测，为潜伏感染的鲤疱疹病毒3型提供一种有效的检测方法和检测试剂盒。本发明提供的套式PCR检测方法及其试剂盒适用于潜伏感染状态的鲤疱疹病毒3型的检测；检测针对无症状的宿主，采样无需致死待检宿主，特异性强，检测灵敏度高，准确性好，适合用于早期监控。 | ||
| 搜索关键词： | 潜伏 感染 疱疹病毒 dna 提取 方法 pcr 检测 及其 试剂盒 | ||
【主权项】：
一种潜伏感染的鲤疱疹病毒3型DNA的提取方法，具体步骤如下：1)细胞分离：从待检敏感宿主的尾静脉采血，将血液与等体积的培养基混合后，加入淋巴细胞分离液后，离心分离得到淋巴细胞层；2)将淋巴细胞层再次与培养基进行混合后，再次离心分离，收集底部的淋巴细胞；3)取步骤2)所得淋巴细胞，洗涤后用PBS重悬并计数；4)DNA提取：步骤3)收集的淋巴细胞数达到106以上后，按照DNA提取试剂盒说明书，对淋巴细胞进行DNA的提取。
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