[发明专利]用于建立临床营养菌种资源库的益生菌筛选方法

摘要

本发明公开一种用于建立临床营养菌种资源库的益生菌筛选方法，首先是建立基于功能的定向收集体系提高初筛效率；进而建立了适宜的粪便标本运送保存体系，延长了粪便标本的有效运送时间2~4倍，保证了分离存活的益生菌菌种数量；最后按照特定的优选试验方法分别筛选出具有促进抑菌及生物拮抗功能、促进代谢功能和促进免疫功能功能的优良菌种，操作简单、筛选效率高，可用于建立临床营养菌种资源库，以便针对个体化差异进行益生菌复配选用，提高治疗效果。

主权项

一种用于建立临床营养菌种资源库的益生菌筛选方法，其特征在于依次按照如下步骤进行：a. 分别采集代谢功能好、免疫力强及抗感染能力强的人群新鲜粪便为标本；b. 用选择性培养基筛选出各种益生菌菌株；c. 通过试验进一步筛选出具有促进抑菌、生物拮抗功能的优良益生菌菌株、具有促进代谢功能的优良益生菌菌株及促进免疫功能的优良益生菌菌株：c.1 根据基本生物特性进行筛选进行对酸性环境和胆汁的耐受能力、细菌的粘附能力试验，将耐受能力好、粘附能力强的菌株作为初步筛选菌株进行下一步筛选；c.2 定植抗力功能体外筛选对初步筛选的菌株进行抑菌实验，筛选能有效抑制病菌的益生菌菌株，所述病菌为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和白色念珠菌；c.3 促进代谢功能体外筛选通过检测初步筛选的菌株的胰蛋白酶、胃蛋白酶、胞外蛋白酶、肽酶、乙醇脱氢酶、乙醛脱氢酶等活性，筛选具有不同代谢功能的益生菌菌株；c.4 促进免疫功能体外筛选以PBMC作为体外免疫筛选的实验细胞，检测初步筛选的菌株对PBMC细胞因子分泌的影响，筛选免疫刺激功能强的益生菌菌株。