[发明专利]一种真空辅助农杆菌侵染的大豆遗传转化方法

摘要

本发明公开了一种真空辅助农杆菌侵染的大豆遗传转化方法，包括以下步骤：1)获得大豆未成熟胚；2)利用农杆菌侵染，真空辅助转化步骤1)中所获得的未成熟胚后将其转移至共培养基培养；3)利用除菌培养基清洗步骤2)中产生的未成熟胚，清洗后未成熟胚转移至含筛选剂的诱导培养基进行诱导，产生抗性愈伤组织；4)利用含筛选剂的分化培养基对步骤3)中产生的抗性愈伤组织进行分化形成诱导芽，通过继代和生根培养获得再生苗；5)对步骤4)获得的所述再生苗进行炼苗和移栽，收获转基因植株的种子。本发明缩短了以往大豆未成熟胚遗传转化周期，当代就能获得大量的转基因植株，后代遗传稳定，在大豆育种或其基因功能研究中有广阔的应用前景。

主权项

1.一种真空辅助农杆菌侵染的大豆遗传转化方法，其特征在于，包括以下步骤：/n1)获得大豆未成熟胚；/n2)利用农杆菌侵染，真空辅助转化步骤1)中所获得的未成熟胚后将其转移至共培养基培养；/n3)利用除菌培养基清洗步骤2)中产生的未成熟胚，清洗后未成熟胚转移至含筛选剂的诱导培养基进行诱导，产生抗性愈伤组织；/n4)利用含筛选剂的分化培养基对步骤3)中产生的抗性愈伤组织进行分化形成诱导芽，通过继代和生根培养获得再生苗；/n5)对步骤4)获得的所述再生苗进行炼苗和移栽，收获转基因植株的种子，/n其中，所述未成熟胚是大豆开花25-30天的未成熟种子，去掉种皮和胚芽后获得的未成熟胚，长度3-6mm；/n所述未成熟胚的背面划6-9刀，深度0.3-0.6mm，长度1-3mm；/n所述步骤4)中，当所述诱导芽长到2-3cm时转入生根培养基中培养，每两周继代一次，直至根长2-3cm，获得所述再生苗。/n