[发明专利]一种治疗乳腺癌的CAR‑T细胞制剂的制备方法在审
申请号: | 201611221435.4 | 申请日: | 2016-12-26 |
公开(公告)号: | CN106511379A | 公开(公告)日: | 2017-03-22 |
发明(设计)人: | 张同存;胡广;顾潮江;柳浥时 | 申请(专利权)人: | 武汉波睿达生物科技有限公司 |
主分类号: | A61K35/17 | 分类号: | A61K35/17;A61P35/00;A61P15/14;C12N5/0783 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 430000 湖北省武汉市东湖开发区高新大道*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种治疗乳腺癌的CAR‑T细胞制剂的制备方法,包括以下步骤S1,抽取患者自身的血液,分离出T细胞,选取1‑3mm3的T细胞,放入离心管中,加入1mg/ml的胶原酶浸润,在36‑38℃消化2‑4小时;S2,向S1中离心管加入D‑Hank’s平衡盐溶液冲洗细胞2‑6次,离心力200‑400g,持续6‑8min,获得混合液;S3,将混合液放在培养皿中,并将培养皿放入培养箱内,培养箱内的温度为36‑38℃,含有5‑7%的CO2,扩增培养;S4,将慢病毒对S3中培养所得T细胞进行转染并扩增培养,获得CAR‑T细胞;S5,将S4中制备的CAR‑T细胞与人血白蛋白以11‑2的比例混匀。本发明成分明确,制作简便,有效降低乳腺癌患者的复发和提高治疗效果,为CAR‑T细胞的临床推广应用提供了更便捷的方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 治疗 乳腺癌 car 细胞 制剂 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种治疗乳腺癌的CAR‑T细胞制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S1,抽取患者自身的血液,分离出T细胞,选取1‑3mm3的T细胞,放入离心管中,加入1mg/ml的胶原酶浸润,在36‑38℃消化2‑4小时;S2,向S1中离心管加入D‑Hank’s平衡盐溶液冲洗细胞2‑6次,离心力200‑400g,持续6‑8min,获得混合液;S3,将混合液放在培养皿中,并将培养皿放入培养箱内,培养箱内的温度为36‑38℃,含有5‑7%的CO2,扩增培养;S4,将慢病毒对S3中培养所得T细胞进行转染并扩增培养,获得CAR‑T细胞;S5,将S4中制备的CAR‑T细胞与人血白蛋白以1:1‑2的比例混匀,并加入生理盐水,制成可以治疗乳腺癌的CAR‑T细胞制剂。
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