[发明专利]一种TIL细胞体外扩增培养基组合和培养方法

摘要

本公开涉及一种TIL细胞体外扩增培养基组合，包括诱导培养基、增殖培养基和活化适应培养基；所述诱导培养基的组成成分包括基础培养基、灭活动物血清、香菇多糖、黄芪多糖、党参多糖和枸杞多糖；所述增殖培养基的组成成分包括基础培养基、灭活动物血清、白细胞介素和单克隆抗体；所述活化适应培养基包括基础培养基、胰岛素、转铁蛋白和谷氨酰胺。通过上述技术方案，利用本公开所提供的TIL细胞体外扩增培养基组合和方法培养获得的TIL细胞数量更多，在临床治疗中也具有更高的靶细胞杀伤活性。

主权项

一种TIL细胞体外扩增培养方法，其特征在于，包括使用TIL细胞体外扩增培养基组合，所述方法包括：诱导培养：将TIL细胞接种于诱导培养基中培养2‑4天获得诱导培养细胞；增殖培养：将所述诱导培养细胞接种于增殖培养基中培养7‑12天获得增殖培养细胞；活化适应：将所述增殖培养细胞接种于活化适应培养基中培养0.5‑1.5天；所述诱导培养、增殖培养和活化适应在免疫细胞体外扩增装置中进行，所述装置包括细胞培养袋(1)和承载所述细胞培养袋(1)的承载台(3)，该装置还包括容纳于所述细胞培养袋(1)中的磁性浮球(2)以及在悬挂于所述细胞培养袋(1)上方并且能够驱动所述磁性浮球(2)在所述细胞培养袋(1)中移动的磁性悬挂驱动器(4)，所述磁性悬挂驱动器(4)包括能够吸引所述磁性浮球(2)的磁体片(41)和能够悬挂且驱动所述磁体片(41)在所述细胞培养袋(1)上方移动的悬挂驱动架(42)；所述细胞培养袋(1)中充有细胞培养液，述细胞培养液中含有培养基以及待扩增的细胞；所述磁性浮球(2)在浮力和磁力的合力作用下漂浮在培养液液面上；所述磁体片(41)能够在所述细胞培养袋(1)上方往复移动，从而通过磁力的作用，驱动所述磁性浮球(2)在漂浮状态下在培养液液面往复移动，所述磁性浮球(2)在培养液液面以下的部分能够搅拌培养液；所述TIL细胞体外扩增培养基组合包括诱导培养基、增殖培养基和活化适应培养基；所述诱导培养基的组成成分包括：基础培养基、灭活动物血清、香菇多糖、黄芪多糖、党参多糖和枸杞多糖；所述增殖培养基的组成成分包括：基础培养基、灭活动物血清、白细胞介素和单克隆抗体；所述基础培养基为AIM‑V培养基和RPMI‑1640培养基；所述白细胞介素为IL‑7、IL‑12和IL‑15；所述单克隆抗体为CD3单克隆抗体、CD134单克隆抗体和PD‑1单克隆抗体；所述活化适应培养基包括：基础培养基、胰岛素、转铁蛋白和谷氨酰胺。