[发明专利]一种利用茶树花的酶合成1‑苯基乙醇的方法

摘要

本发明公开了一种利用茶树花的酶合成1‑苯基乙醇的方法，包括茶树花酶的提取和利用提取的酶合成1‑苯基乙醇两个主要步骤。用100 mM的磷酸钾缓冲液（pH7）充分匀浆茶树花提取茶树花酶。利用提取的茶树花酶和苯乙酮在100 mM磷酸钾缓冲液中进行反应生成1‑苯基乙醇。1‑苯基乙醇合成的反应温度为55℃，反应pH值为4.5‑5.3，反应时间为100分钟。本发明利用价格低廉的苯乙酮通过酶促反应特异性合成价格高昂的1‑苯基乙醇，且无副产物生成。本发明具有合成方法简单，合成效率高，耗时短，绿色无污染等有优点，具有很高的应用推广价值。

主权项

一种利用茶树花的酶合成1‑苯基乙醇的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）1‑苯基乙醇合成酶粗酶的制备：将聚乙烯吡咯烷酮和3‑[3‑(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐加入茶树花中；用pH值为7的磷酸钾缓冲液在冰上充分匀浆，缓冲液中同时含有1%的甘油，1 mM EDTA；匀浆产物在4℃下离心15‑20分钟；离心之后的上清液通过PD‑10脱盐柱将目的蛋白用含有0.1%甘油、0.1 mM EDTA的磷酸钾缓冲液洗脱，缓冲液的浓度为10 mM, pH值为7，得到1‑苯基乙醇合成酶粗酶；（2）1‑苯基乙醇的合成：底物苯乙酮在1‑苯基乙醇合成酶粗酶的催化下生成1‑苯基乙醇；反应所使用的缓冲液为100 mM磷酸钾缓冲液；反应液中包含1.25mM的苯乙酮，3.75 mM的辅酶NADPH和0.1 μg/μl的酶。