[发明专利]一种利用pH调控癌细胞凝胶化微胶囊的制备方法及利用该微胶囊杀死癌细胞的检测方法

摘要

一种利用pH调控癌细胞凝胶化微胶囊的制备方法及利用该微胶囊杀死癌细胞的检测方法。本发明属于生物医用材料领域，具体涉及一种利用pH调控癌细胞凝胶化微胶囊的制备方法及利用该微胶囊杀死癌细胞的检测方法。本发明是为了解决现有治疗癌症的方法具有较大副作用的问题。方法：一、PBS缓冲溶液的配制；二、制备氨基化牛血清白蛋白和聚N‑异丙基丙烯酰胺耦联体；三、制备包载海藻酸钠的微胶囊。本发明利用海藻酸钠凝胶化选择性杀死癌细胞，克服了药物治疗对正常组织的毒副作用，同时也展示了利用AFM检测证明细胞死亡的方法。

主权项

一种利用pH调控癌细胞凝胶化微胶囊的制备方法，其特征在于利用pH调控癌细胞凝胶化微胶囊的制备方法具体是按以下步骤进行的：一、PBS缓冲溶液的配制：将NaH2PO4和Na2HPO4混合溶解在去离子水中配制成PBS缓冲溶液；所述NaH2PO4与Na2HPO4的质量比为1:(26～45)；所述PBS缓冲溶液的浓度为45mmol/L～55mmol/L，pH值为8.0～8.2；二、制备氨基化牛血清白蛋白和聚N‑异丙基丙烯酰胺耦联体：将氨基化牛血清白蛋白和聚N‑异丙基丙烯酰胺溶解在步骤一得到的PBS缓冲溶液中，然后采用磁力搅拌反应10h～14h，得到混合液，将混合液透析2d，冷冻干燥，得到氨基化牛血清白蛋白和聚N‑异丙基丙烯酰胺耦联体；所述氨基化牛血清白蛋白的质量与步骤一得到的PBS缓冲溶液的体积比为1mg:(1.1～1.7)mL；所述氨基化牛血清白蛋白和聚N‑异丙基丙烯酰胺的质量比为1:(0.9～1.3)；三、制备包载海藻酸钠的微胶囊：将步骤二得到的氨基化牛血清白蛋白和聚N‑异丙基丙烯酰胺耦联体配置成浓度为10mg/mL～20mg/mL的水溶液，然后向浓度为10mg/mL～20mg/mL的水溶液中依次加入浓度为3～5mg/mL的海藻酸钠、浓度为0.06～0.08mol/L的EDTA‑Ca络合液和异辛醇，混合后震荡10s，超声处理，得到包载海藻酸钠的微胶囊；所述浓度为0.06～0.08mol/L的EDTA‑Ca络合液是由EDTA和CaCl2按质量比为1:1配置而成的；所述浓度为3～5mg/mL的海藻酸钠与浓度为10mg/mL～20mg/mL的水溶液的体积比为1:(1.8～4.4)；所述浓度为0.06～0.08mol/L的EDTA‑Ca络合液与浓度为10mg/mL～20mg/mL的水溶液的体积比为1:(1.8～4.4)；所述异辛醇与浓度为10mg/mL～20mg/mL的水溶液的体积比为1:(0.04～0.08)。