[发明专利]一种复合酶聚合偶联超滤回收乳清蛋白或MPC中蛋白的方法

摘要

本发明涉及一种复合酶聚合偶联超滤进而同时提高乳清蛋白或MPC中蛋白回收率、提高膜通量、降低乳糖截留率的有效方法，具体顺序添加漆酶和转谷氨酰胺酶，将复合酶聚合与超滤有效契合；创造性地在复合酶聚合前采用两段式预处理方式，又结合漆酶作用后不灭酶的方式，大大提高了乳清蛋白或MPC中蛋白回收效率和纯度，提高膜通量，降低了乳糖截留率，与现有技术相比，乳清蛋白或MPC中蛋白回收率提高20%，膜通量提高30%~40%，乳糖的截留率降低10%，获得一个同时有效解决多个问题的方法。还提供一种高品质乳清蛋白或MPC中蛋白产品，意外发现产品致敏性明显降低；该效果是各工序及参数相辅相成、协同作用的结果，该方法可操作性强，仅采用一次过滤，利于产业化。

主权项

一种复合酶聚合偶联超滤回收乳清蛋白或MPC中蛋白的方法，其特征在于，该方法同时提高乳清蛋白或MPC中蛋白成分回收率、提高膜通量、降低乳糖截留率，该方法按照以下步骤进行：（1）原料准备：取40ml干酪乳清或MPC透析液，可以于4 °C冷藏备用；（2）复合酶聚合： 取40ml干酪乳清或MPC透析液放入丝口瓶中，用氢氧化钠和/或盐酸调节pH值，将干酪乳清或MPC透析液的pH值调至4.5‑6.0，加入漆酶120 U和5 mol/l的阿魏酸3‑5ml，然后将装有混合溶液的丝口瓶置于恒温水浴锅中，于35‑45 °C反应1‑2h，灭酶，之后再次调节溶液pH值调至6.5‑8.0，加入转谷氨酰胺酶160U和20mM DTT 3‑5ml，继续于35‑45 °C反应1 ‑2h，灭酶，得含有蛋白聚合物的乳清溶液；冷却至10°C以下；（3）偶联超滤：使用截留分量10kDa的超滤膜，跨膜压力0.15MPa;；优选PES聚醚砜超滤膜，进一步优选采用死端过滤的方式；（4）指标测定：蛋白回收率、膜通量、乳糖截留率的测定。