[发明专利]羊布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒

摘要

本发明涉及羊布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒。本发明将提纯的布鲁氏菌脂多糖(LPS)经定量后包被96孔酶标板，以人工免疫健康绵羊制备阳性血清，以健康非免疫绵羊血清作阴性血清，以HRP标记兔抗羊Fc端抗体、底物溶液、终止液、样品稀释液、HRP标记兔抗羊IgG稀释液及20×洗涤液等组分组装而成，用于检测羊血清中的光滑型布鲁氏菌抗体。本发明在常规提取LPS中，增加了蛋白酶K消化和苯酚抽提步骤，有效提高了LPS纯度；筛选了对山羊和绵羊均具有良好亲和力的单克隆抗体作为酶标二抗。本发明通过对主要试剂配方的改进和优化，有效控制试剂盒的反应背景，缩短了高通量检测所需的时间。

主权项

1.一种羊布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒，其特征在于该试剂盒主要含有：以制备的布鲁氏菌脂多糖作为包被抗原，以人工免疫健康绵羊制备阳性血清，以采集健康非免疫绵羊血清作阴性血清，以HRP标记鼠抗羊IgG Fc抗体、底物溶液、终止液、样品稀释液、HRP标记鼠抗羊IgG稀释液及20×洗涤液组分组装而成，用于检测绵羊和山羊血清中的光滑型布鲁氏菌抗体；其中：HRP标记鼠抗羊IgG Fc抗体是由被命名为抗羊IgG Fc段单克隆抗体细胞6F9株制备的，该细胞株已于2016年11月14日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所内中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏编号为CGMCCNo.13282。