[发明专利]利用代谢工程消除阿卡波糖生产菌株产生组分C的方法在审
| 申请号： | 201610962770.3 | 申请日： | 2016-10-28 |
| 公开（公告）号： | CN106566797A | 公开（公告）日： | 2017-04-19 |
| 发明（设计）人： | 白林泉;赵芹芹 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/76;C12P19/26;C12R1/045 |
| 代理公司： | 上海科盛知识产权代理有限公司31225 | 代理人： | 杨元焱 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种利用代谢工程消除阿卡波糖生产菌Actinoplanes spp.产生组分C的方法，是通过缺失阿卡波糖生产菌Actinoplanes spp.中编码麦芽寡聚糖基海藻糖合成酶(TreY)的treY(ACPL_6622)基因，消除该类菌株发酵过程中副产物组分C的积累。本发明所获得的工程菌株QQ‑2不积累组分C，同时阿卡波糖产量提高10.7％。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 代谢 工程 消除 阿卡波糖 生产 菌株 产生 组分 方法 | ||
【主权项】：
一种利用代谢工程消除阿卡波糖生产菌株中组分C的产生的方法，其特征在于：通过缺失阿卡波糖生产菌Actinoplanes spp.中编码麦芽寡聚糖基海藻糖合成酶的treY基因，消除该类菌株发酵过程中副产物组分C的积累；具体步骤如下：第一步：构建用于treY基因敲除的重组质粒pLQ756；第二步：将重组质粒pLQ756通过菌丝体接合转移的方式导入阿卡波糖生产菌株Actinoplanes spp.，获得接合子；第三步：获得的接合子经培养、松弛、涂布平板后，挑取单菌落，并验证是否为阿泊拉霉素敏感型；将具有阿泊拉霉素抗性的菌株培养后，抽提基因组，进行PCR验证，获得对treY缺失突变株QQ‑2；第四步：对treY缺失突变株QQ‑2进行发酵，对发酵液进行HPLC和LC‑MS分析。
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