[发明专利]一种多抗霉素在人参上的残留分析方法

摘要

本发明提供了一种多抗霉素在人参上的残留分析方法，建立了种多抗霉素在人参上的残留分析方法，用含甲酸的水溶液均质提取样品中残留的多抗霉素，过膜后，液相色谱质谱‑质谱（HPLCMS‑MS）检测，采用不含待测农药的空白基质溶液建立校正的标准曲线，外标法定量。前处理简单所用有机试剂较少，回收率符合农药残留准则要求，方法符合目前绿色环保的要求。并且检测方法的准确度、精密度满足残留分析的技术要求，检测低限达到国内外技术法规和限量标准要求。本发明平均回收率为74.6%～94.7%，平均相对标准偏差（RSD）为1.3%～7.8%，检出限低于0.06mg/kg，具有操作简便、快速、灵敏度高、特征性强、重复性好、定性定量准确的优点。

主权项

一种多抗霉素B在人参上的残留分析方法，包括以下步骤：1)样品中多抗霉素B用甲酸水溶液提取：⑴鲜人参：称取鲜人参样品5.0g，加入0.3％甲酸水溶液20mL，调节pH范围2‑5，匀浆约2min，在铺有助滤剂的布氏漏斗中减压抽滤，将滤液全部收集后，吸取部分滤液12000rpm离心5min，过0.22μm滤膜，待液相色谱‑质谱联用仪检测；⑵人参干粉：称取人参干粉样品5.0g，加入0.3％甲酸水溶液20mL，调节pH范围2‑5，振荡提取1h，在铺有助滤剂的布氏漏斗中减压抽滤，将滤液全部收集后，吸取部分滤液12000rpm离心5min，过0.22μm滤膜，待液相色谱‑质谱联用仪检测；2)分析测试：⑴仪器条件：色谱柱：Agilent Zorbax RRHD Eclipse Plus C18 3.0×100mm 1.8μm；流动相：乙酸铵2.5mmol/L+0.05％甲酸水溶液∶甲醇梯度洗脱；梯度洗脱程序：流速：0.3mL/min；柱温：30℃；进样量：10μl；⑵质谱分析条件：电离源模式：电喷雾离子化；电离源极性：正离子模式(ESI+)；扫描方式：多反应监测(MRM)；雾化气：氮气；雾化气压力：45psi；毛细管电压：4000V；干燥气温度：400℃；干燥气流速：12L/min；多抗霉素B：定量离子：508.1/490.1；定性离子：508.1/366；源内碎裂电压：120V；碰撞气能量：508.1/490.1为10V；508.1/366为20V；3)用基质建立标准曲线，外标法定量多抗霉素B；⑴标准曲线的建立：准确称取多抗霉素B标准品0.0345g，用10％甲醇水溶液定容至10ml，配制成1000mg/kg的标准母液，再将此标准母液稀释成0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0mg/kg系列的标准溶液，按照上述液相条件测定，进样量5μl，得到色谱图，以进样浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，直线回归方程为Y＝12216x‑149.29，相关系数为r＝0.9994；⑵最小检出限：在上述条件下，多抗霉素B的最低检出量为1.05×10‑1ng；⑶最低检出浓度根据添加回收率实验，在上述仪器条件下多抗霉素B在土壤、植株、鲜人参和人参干粉中的最低检出浓度为0.2mg/kg；⑷相对保留时间多抗霉素B在液相色谱‑质谱联用仪上的相对保留时间为1.69min；⑸添加回收率与相对标准偏差：以鲜人参和人参干粉为基质，添加多抗霉素B为0.2、1、5mg/kg三个水平，重复5次，按照上述前处理方法和仪器条件测定方法回收率；多抗霉素B在鲜人参和人参干粉中的平均回收率分别74.7～94.7％和74.6～86.0％，变异系数分别为1.3～4.2％和4.6～7.8％；4)结果计算试料中农药的残留量用质量分数w计，数值以毫克每千克(mg/kg)表示，按公式(1)计算：ω=ρs×V0m...(1)]]>式中：w——试料中农药的残留量用质量分数，单位为毫克每千克(mg/kg)；ρs——试样溶液质量浓度，单位为毫克每升(mg/L)；V0——试样溶液最终定容体积，单位为毫升(ml)；m——试样质量，单位为克(g)；计算结果保留小数点后两位有效数字。