[发明专利]利用山羊生产抗ApoA1多抗血清的方法

摘要

本发明公开了一种利用山羊生产抗ApoA1多抗血清的方法，选用免疫反应能力更强，血清脂肪含量低的山羊为原料，将ApoA1抗原经皮下注入山羊腹股沟外并进行多次加强免疫，共进行七次免疫注射，每次注射较上一针ApoA1抗原量逐渐增加，能够不断激活T细胞和B细胞的应答反应，更好产生有效抗体，使其产生高效羊抗ApoA1抗体效价可达132以上，大幅度提高了抗体效价，增加稳定性以及灵敏度，为生物试剂厂提供原料、为医疗诊断提供方便，使山羊产生了高的应用价值和效益，同时降低了试剂厂家一半的成本，经济价值和社会价值显著。

主权项

一种利用山羊生产抗ApoA1多抗血清的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)免疫原乳剂的制备：将含有ApoA1抗原10mg的血清0.1ml，无菌PBS1.9ml，弗氏佐剂2ml混合并乳化，得到免疫原乳剂为免疫第一针量；第二针将ApoA1抗原量增加为20mg，第三针增加为30mg，第四针增加为40mg，第五针增加为50mg，第六针增加为60mg，第七针增加为70mg，其余相同操作；(2)山羊免疫第一针：在山羊的前后腹股沟，每腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点，皮下注射，颈部两侧2个注射点平均注射；(3)山羊免疫第二针：与第一针间隔十五天注射第二针，在前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点，颈部两侧淋巴结左右2个点；(4)山羊免疫第三针：与第二针间隔十天注射第三针，在前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点；(5)山羊免疫第四针：与第三针间隔十天注射第四针，在前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点；(6)山羊免疫第五针：与第四针间隔十天注射第五针，在前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点；(7)山羊免疫第六针：与第五针间隔十天注射第六针，在前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点；(8)山羊免疫第七针：与第六针间隔十天注射第七针，在前后腹股沟分2个区域注射，总共12个注射点；(9)与第七针注射间隔十天对免疫的山羊动脉采血，血液放入水箱中，在温度40℃下保存1h，待血清充分析出，经离心沉淀分离出抗血清，放进冰箱进行保存，保存温度为4‑8℃；(10)对步骤(9)所得抗血清进行效价测定。