[发明专利]温度、酸度控制纤维素酶在巨大芽孢杆菌中表达的方法有效
| 申请号： | 201610853941.9 | 申请日： | 2016-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN106191013B | 公开（公告）日： | 2019-11-08 |
| 发明（设计）人： | 薛栋升;梁龙元 | 申请（专利权）人： | 湖北工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N15/56;C12N15/75;C12N1/21;C12R1/11 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 常海涛 |
| 地址： | 430068 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种温度、酸度控制纤维素酶在巨大芽孢杆菌中表达的方法，属于基因工程领域。本发明方法包括如下步骤：将SEQ ID NO.1所示序列、SEQ ID NO.2所示序列通过限制性内切酶SmaI、XbaI及DNA连接酶分别连接到载体上构建同源重组质粒；将所构建的两个同源重组质粒转化巨大芽孢杆菌ATCC 14581，筛选同源重组成功的菌株。本发明以巨大芽孢杆菌为表达宿主，通过同源重组将纤维素外切酶基因和纤维素内切酶基因置于温度调控或酸调控元件下，实现了纤维素外切酶或内切酶的可控表达，从而能对黑曲霉纤维素酶进行定向复配，使纤维素外切酶、内切酶、葡糖苷酶达到合适的比例，提高纤维素催化效率。 | ||
| 搜索关键词： | 温度 酸度 控制 纤维素酶 巨大 芽孢 杆菌 表达 方法 | ||
【主权项】：
1.一种温度、酸度控制纤维素酶在巨大芽孢杆菌中表达的方法，其特征在于：包括如下步骤：将SEQ ID NO.1所示序列通过限制性内切酶SmaI及DNA连接酶连接到载体上构建同源重组质粒，将SEQ ID NO.2所示序列通过限制性内切酶XbaI及DNA连接酶连接到载体上构建同源重组质粒；将所构建的两个同源重组质粒转化巨大芽孢杆菌ATCC 14581，筛选同源重组成功的菌株。
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