[发明专利]一种同时检测兽药中多种抗菌成分的方法

摘要

本发明公开了一种同时检测兽药中多种抗菌成分的方法，包括制备对照储备液、制备样品溶液、UPLC‑PDA检测和比对图谱。本发明利用UPLC法联合PDA法建立了一种能够同时分离、并测定兽药中22种磺胺类药物和9种喹诺酮类药物的检测方法。本发明方法既可以定性，也可以定量测定，通过与对照色谱图中的保留时间和光谱图中峰型的比较，可对其中的药物成分进行定性，在此基础上，通过外标法对药物成分进行定量检测。本发明提出的检测方法操作简便、快速、准确，适用范围宽、设备造价低廉、同时检出的目标化合物多，可以作为兽药制剂中非法添加物的检查方法，为规范兽药市场提供了技术保障，为兽药市场的监管提供了技术支持。

主权项

一种同时检测兽药中多种抗菌成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)、制备对照储备液：分别将多种抗菌成分用溶剂A配制成浓度均为1mg/ml的对照储备液；步骤2)、制备样品溶液：称取兽药样品，用溶剂A配制成样品溶液；步骤3)、UPLC‑PDA检测：分别将步骤1)得到的对照储备液和步骤2)得到的样品溶液注入超高效液相色谱仪UPLC，以PDA为检测器进行梯度洗脱程序，得到对照图谱和样品图谱，所述图谱包括色谱图和光谱图；步骤4)、比对图谱：将步骤3)得到的样品图谱与对照图谱分别进行比对，得出兽药样品中添加的抗菌成分的种类和添加量；所述步骤3)UPLC‑PDA检测的色谱柱选用Agilent ZORBAX SB‑C18 HD；流速：0.2mL/min；柱温：25℃；进样量：1μL；流动相A为体积百分含量为0.05％‑0.2％、pH＝3.35‑3.45的甲酸水溶液，流动相B为乙腈；所述梯度洗脱程序分为八个阶段：阶段①：0‑7min,9％‑14％流动相B；阶段②：7‑20min，14％‑15.5％流动相B；阶段③：20‑25min，15.5％‑20％流动相B；阶段④：25‑30min，20％‑24％流动相B；阶段⑤：30‑37min，24％‑30％流动相B；阶段⑥：37‑39min，30％‑50％流动相B；阶段⑦：39‑39.5min，50％‑9％流动相B；阶段⑧：39.5‑42min，9％‑9％流动相B；所述抗菌成分为磺胺类药物和喹诺酮类药物，所述磺胺类药物包括磺胺脒、磺胺、苯磺酰胺、磺胺醋酰、磺胺嘧啶、甲氧苄啶、磺胺吡啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺氯哒嗪钠、磺胺多辛、磺胺甲恶唑、磺胺异噁唑、磺胺苯甲酰、磺胺氯吡嗪钠、磺胺地索辛、磺胺喹噁啉、磺胺苯吡唑、磺胺硝苯；所述喹诺酮类药物包括马波沙星、氧氟沙星、洛美沙星、二氟沙星、培氟沙星、环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星。