[发明专利]透明质酸修饰的介孔碳酸钙药物组合物的制备方法及应用

摘要

本发明涉及透明质酸修饰的介孔碳酸钙药物组合物的制备方法及应用，可有效解决同时具有靶向、控释、声疗联合超声成像的问题，实现癌症诊疗一体化，技术方案是：该组合物是在介孔碳酸钙与3‑氨丙基三乙氧基硅烷反应得到的氨基化的碳酸钙上修饰上透明质酸，再负载小分子声敏剂，得透明质酸修饰的介孔碳酸钙药物组合物；本发明制备工艺简单，方法稳定可靠，生产费用低，制备的透明质酸修饰的介孔碳酸钙及其药物组合物同时具备肿瘤靶向、体内外双刺激（酸性环境和高聚焦超声条件下）敏感释药、声动力学治疗联合超声成像实现诊疗一体化等多重功效，是肿瘤治疗药物上的创新，经济和社会效益巨大。

主权项

1.一种透明质酸修饰的介孔碳酸钙药物组合物的制备方法，其特征在于，该组合物是在介孔碳酸钙与3‑氨丙基三乙氧基硅烷反应得到的氨基化的碳酸钙上修饰上透明质酸，再负载小分子声敏剂，得透明质酸修饰的介孔碳酸钙药物组合物；所述的透明质酸为分子量等于或低于400 kDa，并等于或高于40kDa的低分子量透明质酸；所述的介孔碳酸钙的粒径为300~400nm；所述小分子声敏剂为二氢卟吩、金属酞菁及血卟啉单甲醚中的一种；具体制备方法包括以下步骤：（1）将0.6‑0.7g的CaCl₂溶解于1000ml水中，配置成CaCl₂溶液；将0.6‑0.7g的Na₂CO₃溶解于1000ml水中，配置成Na₂CO₃溶液；将可溶性淀粉2‑3g溶解于1000ml水中，配置成可溶性淀粉溶液；（2）将步骤（1）配置的CaCl₂溶液100‑150ml 和可溶性淀粉溶液100‑150ml混合，搅拌20‑40min，再向该混合液中加入100‑150ml Na₂CO₃溶液，剧烈搅拌10‑20min，静置22‑26h；12000rpm离心5‑10min得沉淀，沉淀用超纯水复溶，再离心再复溶，如此重复2‑3遍，冷冻干燥，得介孔碳酸钙纳米颗粒；（3）将140‑200mg介孔碳酸钙纳米颗粒超声分散于60‑80ml无水乙醇中，再加入600‑800μl 3‑氨丙基三乙氧基硅烷，3‑4ml水和3‑4ml浓氨水，搅拌8‑12h，12000rpm离心5‑10min得沉淀，沉淀再用无水乙醇复溶，再离心再复溶，如此重复2‑3遍，冷冻干燥，得氨基化介孔碳酸钙纳米复合物；（4）将700‑800mg透明质酸加入pH 7‑9的磷酸盐缓冲液40‑50ml中，搅拌溶解，加入1.8‑2.0g 1‑乙基‑（3‑二甲基氨基丙基）碳二亚胺、1.0‑1.2g活化剂羟基琥珀酰亚胺，室温搅拌25‑35min，得活化的透明质酸；（5）在冰浴下，将步骤（3）制备的氨基化介孔碳酸钙纳米复合物用pH7‑9的磷酸盐缓冲液分散，成1mg/ml的分散液，将活化的透明质酸缓慢加入分散液中，升至室温，反应2.5‑3.5h，12000rpm离心5‑10min得沉淀，沉淀加水分散，在水中透析2d，冷冻干燥，得透明质酸修饰的介孔碳酸钙纳米复合物；（6）将12‑18mg小分子声敏剂溶解于4‑6ml无水乙醇中，搅拌，将步骤（5）制备的透明质酸修饰的介孔碳酸钙纳米复合物4‑6mg探超分散于4‑6ml超纯水中，搅拌20‑30h，12000rpm离心5‑10min得沉淀，沉淀再用无水乙醇和水按照体积比1：1混合的混合液复溶，再离心再复溶，如此重复2‑3遍，冷冻干燥，即得透明质酸修饰的介孔碳酸钙药物组合物；所述小分子声敏剂为二氢卟吩、金属酞菁及血卟啉单甲醚中的一种。