[发明专利]特效干细胞体外诱导技术在审
申请号: | 201610699015.0 | 申请日: | 2016-08-22 |
公开(公告)号: | CN106244523A | 公开(公告)日: | 2016-12-21 |
发明(设计)人: | 王浩 | 申请(专利权)人: | 上海俏佳人医疗美容门诊部股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/074 | 分类号: | C12N5/074 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 200030 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明公开了一种特效干细胞体外诱导技术,包括如下步骤:人脐带干细胞的分离和培养:采用人脐带干细胞,无菌取人脐带华通氏胶,收集细胞悬浮液,原代培养24h和48h各换液1次;再原代培养7d,如果观察到细胞成片,则用胰酶消化后传代到新瓶中,丢弃悬浮细胞,而人脐带干细胞大多数牢固贴壁;加入全培养基开始传代培养,以后每3 d更换1次培养液,连续传3代;体外人脐带干细胞诱导:选取传代时间合适的3代以内干细胞,换液后添加诱导分化剂5‑氮杂胞苷,再添加肝细胞生长因子HGF、基础生长因子EGF+bFGF和干细胞因子SGF,体外诱导24h。本发明使用最新一代的体外诱导技术,让体内干细胞的靶向归巢率为100%。 | ||
搜索关键词: | 特效 干细胞 体外 诱导 技术 | ||
【主权项】:
一种特效干细胞体外诱导技术,其特征在于:所述特效干细胞体外诱导技术具体包括如下步骤:1)人脐带干细胞的分离和培养:首先采用人脐带干细胞,无菌取人脐带华通氏胶,用含12% FBS的DMEM培养液反复冲洗华通氏胶,收集细胞悬浮液,原代培养24h和48h各换液1次;再原代培养7d,如果观察到细胞成片,则用质量百分数为0.3%的胰酶消化后传代到新瓶中,孵箱静置40min后,瓶底朝上,轻轻吹打,丢弃悬浮细胞,而人脐带干细胞大多数牢固贴壁;最后加入全培养基开始传代培养,以后每3 d更换1次培养液,连续传3代;2)体外人脐带干细胞诱导:选取传代时间合适的3代以内干细胞,换液后添加诱导分化剂5‑氮杂胞苷,再添加肝细胞生长因子HGF、基础生长因子EGF+bFGF和干细胞因子SGF,体外诱导24h。
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