[发明专利]一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法。该方法以克雷伯氏菌LDX1‑1和野油菜黄单孢菌CICC10258的混合菌种，采用无拮抗兼容性摇瓶与高镁发酵培养基发酵协同发酵，发酵完成后采用混合盐进行凝胶化强度处理。该制备方法发酵速度快，工艺易于操作，发酵浓度高，生产成本低。生产的絮凝剂用于处理高盐度高浮力海水具有结构稳定，絮块致密，沉降速度快的特点，对养殖海水净化具有显著效果。

主权项

1.一种养殖海水净化用微生物絮凝剂的制备方法，其特征是，(1)生产菌种的扩大培养斜面菌种培养：将克雷伯氏菌LDX1‑1、野油菜黄单孢菌CICC10258，分别接种斜面培养基，24‑32℃各培养24‑48h；摇瓶菌种扩大培养：将上述克雷伯氏菌LDX1‑1、野油菜黄单孢菌CICC10258斜面菌苔分别接种摇瓶培养基，搅匀，24‑30℃培养10‑18h，分别得到克雷伯氏菌LDX1‑1、野油菜黄单孢菌CICC10258摇瓶扩大培养液体菌种备用；(2)发酵培养将发酵培养基按体积比1.5％‑4.0％的接种量接种克雷伯氏菌LDX1‑1、野油菜黄单孢菌CICC10258混合摇瓶扩大培养液体菌种进行发酵，发酵时间为20‑30h；所述克雷伯氏菌LDX1‑1、野油菜黄单孢菌CICC10258混合摇瓶扩大培养液体菌种中，二种菌种的体积比为5‑7：3‑5；(3)发酵液处理将发酵液过滤去除菌体及其它杂质，加入混合盐至终浓度为1.0％‑3.0％，升温至50‑80℃，维持15‑30min后将温度快速降至17‑30℃，得到液体微生物絮凝剂；所述混合盐为：按质量比计，NaCl85％+CaCl₂ 15％；所述摇瓶培养基为：混合碳源10‑20g/L，混和氮源2.1‑4.0g/L，K₂HPO₄ 0.8‑1.5g/L，MgSO₄0.4‑1.0g/L，NaCl 0.3‑0.9g/L，FeSO₄ 0.01‑0.03g/L；所述混合碳源为：按质量比，蔗糖60％+葡萄糖40％；所述混和氮源为：按质量比，NH₄NO₃ 55％+(NH₄)₂SO₄ 45％；所述发酵培养基为：蔗糖25‑40g/L，玉米淀粉12‑25g/L，混和氮源2.0‑3.9g/L，K₂HPO₄0.8‑1.5g/L，MgSO₄ 7‑18g/L，NaCl 0.3‑1.0g/L，FeSO₄ 0.01‑0.04g/L，MnSO₄ 0.01‑0.05g/L；所述混和氮源为：按质量比，NH₄NO₃ 55％+(NH₄)₂SO₄ 45％；所述发酵培养基中的硫酸镁按总质量20％、35％、45％的比例分别在配制发酵培养基时、发酵培养6h和发酵培养9h时三个时间段加入培养基中。