[发明专利]一种具有转糖苷活性耐热β-半乳糖苷酶突变体及其制备方法有效
| 申请号： | 201610580177.2 | 申请日： | 2016-07-21 |
| 公开（公告）号： | CN105950589B | 公开（公告）日： | 2019-11-29 |
| 发明（设计）人： | 陈海琴;董艺凝;陈卫;赵建新;陈永泉;张灏 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/38 | 分类号： | C12N9/38;C12N15/56;C12N15/70;C12P19/14 |
| 代理公司： | 11305 北京君智知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 邢大文<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种转糖苷活性耐热β‑半乳糖苷酶突变体，该突变体是通过对β‑半乳糖苷酶BgaB催化氨基酸位点E303由原谷氨酸(Glu)定点突变为半胱氨酸(Cys)，再将半胱氨酸巯基氧化为‑SOO‑所得。本发明还设计所述突变体的制备方法与应用。本发明以嗜热脂肪芽孢杆菌来源β‑半乳糖苷酶BgaB为对象，采用定点突变体与化学修饰结合的方法，显著加快了转糖苷活性的功能进化效率，并提高了低聚半乳糖的合成量，实现在中温、中性环境下的低聚半乳糖合成量由野生型酶的0％提高到11.5％，突破了现有技术中需要在酸性环境下进行反应的局限，同时避免了在低聚半乳糖合成的同时发生底物或产物的水解。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 具有 糖苷 活性 耐热 半乳糖 突变体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种具有转糖苷活性耐热β-半乳糖苷酶突变体，其特征在于该突变体是通过对β-半乳糖苷酶BgaB催化氨基酸位点E303由原谷氨酸(Glu)定点突变为半胱氨酸(Cys)，再将半胱氨酸巯基氧化为-SOO-所得；所述β-半乳糖苷酶为嗜热脂肪芽孢杆菌来源的耐热β-半乳糖苷酶BgaB。/n
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