[发明专利]一种脂肪源干细胞提取制备方法在审
| 申请号： | 201610570566.7 | 申请日： | 2016-07-19 |
| 公开（公告）号： | CN105969726A | 公开（公告）日： | 2016-09-28 |
| 发明（设计）人： | 张正亮 | 申请（专利权）人： | 安徽惠恩生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0775 | 分类号： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) 11390 | 代理人： | 胡剑辉;韩立峰 |
| 地址： | 230000 安徽省*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开一种脂肪源干细胞提取制备方法，包括下述步骤：获取腹部皮下正常脂肪组织，用PBS冲洗后，再将脂肪组织剪碎，然后用I型胶原酶消化一点时间；消化后，加入PBS混匀过滤，加入含人自体血清的DMEM培养液，放置在培养箱中培养，间隔一定时间用新鲜培养液进行换液一次，细胞从组织块中生长，为原代细胞；当原代细胞达到一定融合度时，再用PBS冲洗，然后加入胰酶和EDTA消化液，待细胞悬浮后，调整细胞密度，再次加入含人自体血清的DMEM培养液培养，为二代细胞；待二代细胞达到一定融合度时，再加入生理盐水，移至离心管中离心过滤，取上清液进行浓缩，提取制得脂肪源干细胞。本发明提取的脂肪源干细胞含有多种生命活性物质，从而增进脂肪来源干细胞的干细胞性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脂肪 干细胞 提取 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种脂肪源干细胞提取制备方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：1)获取腹部皮下正常脂肪组织，用PBS冲洗后，再将脂肪组织剪碎，然后用I型胶原酶消化一点时间；消化后，加入PBS混匀过滤，加入含人自体血清的DMEM培养液，放置在培养箱中培养，间隔一定时间用新鲜培养液进行换液一次，细胞从组织块中生长，为原代细胞；2)当原代细胞达到一定融合度时，再用PBS冲洗，然后加入胰酶和EDTA消化液，待细胞悬浮后，调整细胞密度，再次加入含人自体血清的DMEM培养液培养，为二代细胞；3)待二代细胞达到一定融合度时，再加入生理盐水，移至离心管中离心过滤，取上清液进行浓缩，提取制得脂肪源干细胞。
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