[发明专利]一种Tlr7a诱导增强型DC‑NK细胞的制备方法

摘要

本发明提供了一种Tlr7a诱导增强型DC‑NK细胞的制备方法，本发明技术中DC‑NK细胞是从患者外周血分离、体外培养体系加入一系列细胞因子和Tlr7a刺激获得的高活性淋巴细胞群，通过这种培养方法，DC‑NK细胞大量扩增和活化，增加DC‑NK细胞的杀瘤能力，达到应用于临床治疗肿瘤的水平。通过本发明方法所制备的DC‑NK细胞与普通方法DC‑NK细胞比较，所获得NK细胞杀伤效果显著，明显高于常规方法培养的DC‑NK细胞。本方法可在体外培养条件下获得大量的、应用安全以及杀伤活性更强的DC‑NK细胞，同时具有制备成本低廉、工序简单、条件易控、对设备的要求较低、易于规模化生产等优势。

主权项

一种Tlr7a诱导增强型DC‑NK细胞的制备方法，包括步骤：1) 采集人的外周静脉血，梯度离心获得单个核细胞；2) 分离DC细胞和NK细胞，加入细胞因子和Tlr7a刺激，培养7～9天； 3) 混合DC和NK细胞，Tlr7a诱导刺激共培养3～6天；4)收集DC‑NK细胞。