[发明专利]一种利用糖高粱秆和甘蔗废渣发酵制备β-法呢烯的方法

摘要

本发明涉及一种利用糖高粱秆和甘蔗废渣发酵制备β‑法呢烯的方法，其特征在于采用以下步骤：A：收割成熟新鲜糖高粱压榨制得糖高粱汁；B:对糖高粱汁进行浓缩；C：将糖高粱汁浓缩液与制糖厂生产的副产物甘蔗废渣混合均匀，得糖高粱和甘蔗废渣混合液；D：以糖高粱和甘蔗废渣混合液作为发酵的碳源，以保藏编号为CICC No.32475的酿酒酵母为菌种，制备摇瓶菌种；E：将摇瓶菌种接种到种子培养基中进行培养；G：将种子培养液接入发酵培养基中发酵30‑50 h，向发酵液中加入絮凝剂，沉淀后虹吸得上清液。本发明所用原料成本低，所得上清液中β‑法呢烯含量高，利于降低植物来源角鲨烷的制备成本。

主权项

1.一种利用糖高粱秆和甘蔗废渣发酵制备β‑法呢烯的方法，其特征在于采用以下步骤：A：收割成熟新鲜糖高粱，去除高粱穗、根和叶子，再清洗去除糖高粱秆上的灰尘和泥土，入压榨机进行压榨制得糖高粱汁；B：将步骤A所得糖高粱汁进行过滤、蒸发、浓缩，得水份含量为20%‑25%的糖高粱汁浓缩液；C：将步骤B所得糖高粱汁浓缩液与制糖厂生产的副产物甘蔗废渣以1~3：1的质量比混合均匀，得糖高粱和甘蔗废渣混合液；D：称取适量步骤C所得糖高粱和甘蔗废渣混合液作为发酵的碳源，以酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CICC No. 32475为菌种，摇床转速50‑200 r/min，培养12‑48 h得到摇瓶菌种；E：按以下质量比配制种子培养基：5‑10%葡萄糖，0.1‑0.3%NaNO3，0.05‑0.15%K2HPO4，0.05‑0.15%KH2PO4，0.01‑0.1%MgSO4，0.01‑0.1%FeSO4，0.01‑0.1%ZnSO4，0.01‑0.05%MnSO4，余量为水；F：将摇瓶菌种按2‑10%的体积分数比接种到种子培养基中，100‑300 r/min的范围内振荡培养12‑24 h，得种子培养液；G：按以下质量比配制发酵培养基：10‑20%糖高粱和甘蔗废渣混合液，0.1‑0.3%NaNO3，0.05‑0.15%K2HPO4，0.05‑0.15%KH2PO4，0.01‑0.1%MgSO4，0.01‑0.1%FeSO4，0.01‑0.1%ZnSO4，0.01‑0.05%MnSO4，余量为水；H：按体积分数5‑20%的接种量将步骤F所得种子培养液接入步骤G制备的发酵培养基中，通入空气维持微氧条件，通气量100‑400 ml/min，温度37℃，搅拌转速200‑400 r/min，用3~5 mol/L NaOH溶液调节pH至5~7，发酵30‑50 h后停止发酵，向发酵液中加入0.75 g/L絮凝剂壳聚糖和0.125 g/L助絮凝剂海藻酸钠，调节体系pH =5，搅拌15 min，静置1 h后，虹吸得上清液。