[发明专利]一种提高辣椒体细胞胚发生频率的方法有效
| 申请号： | 201610533011.5 | 申请日： | 2016-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN106171977B | 公开（公告）日： | 2018-10-30 |
| 发明（设计）人： | 邹学校;刘峰;张亚利;戴雄泽;马艳青;李雪峰;郑井元 | 申请（专利权）人： | 湖南省蔬菜研究所 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 长沙市融智专利事务所 43114 | 代理人： | 魏娟;刘擎天 |
| 地址： | 410000 湖*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明为一种提高辣椒体细胞胚发生频率的方法，包括种子的消毒与播种、无菌苗的获得、外植体的选择和愈伤组织的诱导、体细胞胚的诱导、体细胞胚的继代与增值、体细胞胚的成熟步骤；外植体为子叶或下胚轴；从愈伤组织诱导到体细胞胚的成熟过程均在黑暗条件下进行。本发明缩短了辣椒体胚发生的时间，提高了体胚发生的量，从而改善了体胚的发生效率。为实现辣椒转基因研究、生物技术育种等奠定了基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提高 辣椒 体细胞 发生 频率 方法 | ||
【主权项】：
1.一种提高辣椒体细胞胚发生频率的方法，其特征在于，包括种子的消毒与播种、无菌苗的获得、外植体的选择和愈伤组织的诱导、体细胞胚的诱导、体细胞胚的继代与增值、体细胞胚的成熟步骤；外植体为子叶或下胚轴；从愈伤组织诱导到体细胞胚的成熟过程均在黑暗条件下进行；其中，无菌苗的获得过程中使用的MS1培养基为：1/2MS+蔗糖30g/L+琼脂8g/L；外植体的选择和愈伤组织的诱导过程中使用的MS2培养基为：MS+2，4‑D 2mg/L+Biotin1mg/L+半胱氨酸5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L；体细胞胚的诱导过程中使用的MS3培养基为：MS+2，4‑D 1mg/L+半胱氨酸5mg/L+蔗糖35g/L；体细胞胚的继代与增值过程中使用的MS4培养基为：MS+2，4‑D 1mg/L+6‑BA1.5mg/L+Biotin1mg/L+L‑脯氨酸100mg/L+麦芽提取物100mg/L+蔗糖40g/L；体细胞胚的成熟过程中使用的MS5培养基为：MS+ABA0.5mg/L+蔗糖45g/L；从得到的愈伤组织中挑选胚性愈伤组织，将愈伤组织与子叶和下胚轴切分，并转至pH值为5.2～5.4的MS3培养基中诱导体细胞胚，在培养温度为25±2℃，黑暗条件下进行悬浮培养，得到悬浮细胞。
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