[发明专利]从畜禽血球液中提取SOD和血红蛋白寡肽粉的联产工艺

摘要

本发明公开了一种从畜禽血球液中提取SOD和血红蛋白寡肽粉的联产工艺，是以畜禽血球液为原料，经过溶血、热变性反应、压滤后，滤液通过超滤浓缩、纯化、冷冻干燥制得SOD冻干粉；血渣通过酶解、超滤、喷雾干燥制得血红蛋白寡肽粉。本发明利用热变性、等电点沉淀、超滤、酶解等现代生化技术与生物集成技术，制定出SOD和血红蛋白寡肽粉的联产工艺，实现了畜禽血球液的综合利用和高值化开发，无浪费，无污染，生产周期短，适合工业化生产，得到的SOD冻干粉单位酶活力达到4000U/mg干粉以上，得到的血红蛋白寡肽粉产品中分子量小于1000Da的寡肽含量达到85%以上。

主权项

从畜禽血球液中提取SOD和血红蛋白寡肽粉的联产工艺，其特征在于，包括以下步骤：（1）血球液制备：在新鲜的畜禽血中加入柠檬酸钠做抗凝处理，离心分离，收集血红细胞，即得到血球液；（2）溶血：往血球液中加入其体积1‑2倍的去离子水，不断搅拌溶血30‑90min，搅拌速度为30‑60r/min，得到溶血液；（3）热变性反应Ⅰ：用 HCl调节溶血液PH 值至5.2‑5.5，快速升温至60℃，保温30‑60min后，快速冷却至40℃以下，经板框压滤机压滤，滤布目数为200目，分别收集压滤液Ⅰ和血渣Ⅰ；（4）热变性反应Ⅱ：用NaOH调节压滤液ⅠpH值至6.5‑6.8，快速升温至70℃，保温10‑20min后，快速冷却至40℃以下，经板框压滤机压滤，滤布目数为300目，分别收集压滤液Ⅱ和血渣Ⅱ；（5）超滤浓缩：将收集的压滤液Ⅱ经截留分子量为5000Da的超滤膜装置超滤浓缩，浓缩至原体积的1/10，收集SOD粗酶液；（6）纯化：将SOD粗酶液加热升温至45℃，用NaOH调节PH值至9.0，加入SOD粗酶液总质量0.02‑0.05%%的保护剂月桂酰氯，保温反应1小时后，快速冷却至20℃以下，6000r/min离心10min，收集上清液，用 HCl调整上清液PH值至6.5，6000r/min离心10min，收集上清液，即得蓝绿色的SOD酶液；（7）冷冻干燥：向SOD酶液中加入SOD酶液重量的2.0%的保护剂海藻糖，搅拌混合均匀后，进行冷冻干燥，得到淡蓝绿色SOD冻干粉；（8）酶解：将步骤（3）和（4）收集到的血渣Ⅰ和血渣Ⅱ合并，加入两血渣重量3‑5倍的去离子水溶解并搅拌均匀，用NaOH调节pH值至7.2‑7.5，加入蛋白酶，在53‑55℃下酶解3‑8h，将酶解液升温至85℃灭酶15分钟，得到血红蛋白酶解液；（9）离心：将血红蛋白酶解液进行离心分离，收集上清夜，去除沉淀；（10）超滤：将收集的离心上清液经截留分子量为3000Da的超滤膜进行超滤，收集透过液，即得到血红蛋白寡肽溶液；（11） 喷雾干燥：将血红蛋白寡肽溶液喷雾干燥，即得血红蛋白寡肽粉。