[发明专利]一种α-酮戊二酸的制备方法有效

专利信息
申请号: 201610516524.5 申请日: 2016-07-04
公开(公告)号: CN106119307B 公开(公告)日: 2020-01-03
发明(设计)人: 席日新;刘涛 申请(专利权)人: 宜兴市前成生物有限公司
主分类号: C12P7/50 分类号: C12P7/50
代理公司: 32218 南京天华专利代理有限责任公司 代理人: 徐冬涛;邢贤冬
地址: 214253 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种α‑酮戊二酸的制备方法,它以L‑谷氨酸或其盐作为原料,通过L‑谷氨酸脱氨酶在pH=8.0‑9.0、温度30‑50℃的条件下脱去L‑谷氨酸上的氨基,再经活性炭脱色、过滤、经阳离子交换树脂柱纯化、浓缩、结晶得到α‑酮戊二酸成品。本发明方法具有反应条件温和、生产周期短、产品浓度和收率高、环保压力小、适合大规模的工业化生产等优点。采用阳离子树脂分离未转化残留的L‑谷氨酸与α‑酮戊二酸产品,确保产品的收率,回收的L‑谷氨酸可以继续当作起始原料。
搜索关键词: 一种 酮戊二酸 制备 方法
【主权项】:
1.一种α-酮戊二酸的制备方法,其特征在于包括以下具体步骤:/n步骤(1)、采用NaOH水溶液调节去离子水的pH =8.8得到碱性去离子水;L-谷氨酸或其盐溶于碱性去离子水中得到料液;往料液中加入L-谷氨酸脱氨酶,在温度37~39℃下,L-谷氨酸或其盐脱去氨基,L-谷氨酸或其盐在L-谷氨酸脱氨酶作用下转化直至L-谷氨酸的残留小于0.1%,得到转化液;其中,所述的L-谷氨酸或其盐与去离子水的摩尔比为0.5~1:25~30;所述的L-谷氨酸脱氨酶和去离子水的质量体积比为0.02~0.08:100 g/mL;所述的L-谷氨酸脱氨酶的浓度不低于200U/g;所述的L-谷氨酸脱氨酶通过以下方法制得:用灭菌接种环挑取一环大肠杆菌AS1.505,接种到250mL液体培养基中,在温度28~30℃、转速120转/分条件下振动培养,培养18个小时,3000转/分超速离心,沉淀物依次水洗、丙酮洗、乙醚洗,干燥获得L-谷氨酸脱氨酶;其中,液体培养基组分含量g/mL:L-谷氨酸:0.5%,玉米浆:0.4%,酵母浸膏:1%,硫酸镁:0.2%,磷酸二氢钾:0.1%,氨调节pH7.5~7.7;/n步骤(2)、转化液加热至80~85℃,保温0.5~2小时使L-谷氨酸脱氨酶失活;再降温至60~70℃,用硫酸调节pH=2.5~3.0,加入活性炭脱色,过滤得到滤液;/n步骤(3)、滤液上732阳离子交换树脂柱,收集柱下流出液,滤液上完后采用无离子水压柱,收集压柱液,柱下流出液和压柱液采用茚三酮检测,合并无氨基酸黄色反应的柱下流出液和压柱液,得纯化液;/n步骤(4)、纯化液真空浓缩至析出结晶,浓缩液在温度3~4℃下结晶,抽滤、固体在温度60~65℃下真空烘箱烘干得α-酮戊二酸产品。/n
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