[发明专利]直接观察盐生草根系及周围环境盐分的方法

摘要

本发明涉及盐生草盐分直接观察的方法，提供了一种直接观察盐生草根系及周围环境盐分的方法。主要步骤包括：1.以琼脂为基质，培育盐生草无菌苗；2.待幼苗生长至2‑3个月，将琼脂包裹的盐生草无菌苗原封不动地取出；3.保留琼脂固定的根系，沿根系横切切片；4.以根系横截面为中心纵切切片；5.切片用液氮速冻，然后真空冷冻干燥；6.用电镜扫描，并通过能量色散X射线光谱仪测定不同NaCl处理下根系横截面和周围琼脂中盐分的重量百分比。该方法能准确直观地观察盐生草根系内部与周围环境中盐分的差异；过程操作简单，避免了外界环境的干扰，为研究不同植物对矿质元素的吸收，尤其是观察根系吸收特征提供了更为便捷有效的方法。

主权项

1.一种直接观察盐生草根系及周围环境盐分的方法，其特征在于步骤为：(1)以琼脂为基质，培育0‑300mM NaCl处理下的盐生草无菌苗，培养基为Hoagland完全营养液，4‑6g/L琼脂，pH为5.7‑5.8；(2)待步骤(1)的盐生草无菌苗生长至2‑3个月，将琼脂包裹的盐生草无菌苗原封不动地取出，切去幼苗茎、叶部分，原样保留琼脂固定根系的状态；(3)用双面刀片将步骤(2)琼脂包裹的盐生草无菌苗的琼脂固定根系从根尖往上0.5‑1.0cm处横切，保留固定根尖部分的琼脂，在1‑2min内横切成厚度为0.2‑0.5cm的切片；(4)将步骤(3)获得的切片以根系横截面为中心纵切，留取琼脂厚度0.2‑0.5cm的琼脂包裹根系横截面的切片，用镊子在1‑2min之内将琼脂包裹根系横截面的小切片移入置有液氮的铝盒，速冻5‑10min；(5)液氮速冻后，在2‑3min之内将步骤(4)装有小切片的铝盒放入冷冻干燥机，真空冷冻干燥12‑18h，真空度为15‑80pa，温度为‑50℃；(6)将步骤(5)所获小切片中根系横截面和周围琼脂进行电镜扫描观察，利用能量色散X射线光谱仪分别测定不同NaCl处理下根系横截面和周围琼脂中Na的重量百分比。