[发明专利]一种用于油污清洗的微生物制剂的制备方法

摘要

本发明公开了一种用于油污清洗的微生物制剂的制备方法，属于清洗剂领域。本发明从先放芽孢杆菌IOS1‑7和假单胞菌HPS2‑5进行培养，培养后划线选取菌落进行富集培养得到菌体，对菌体用不同浓度的油污驯化得到可以降解油污的菌体，配置成菌液后与甲壳素、氨基酸、玉米粉等物质混合发酵，得到发酵液即为油污清洗剂，本发明通过筛选、驯化出功能微生物菌株，能够乳化油污中的成分，利用微生物菌种的代谢活动，吸收和降解油污类固体物，同时代谢出糖脂类表面活性剂、蛋白酶、纤维素酶等成分，有效促进有机类物质的降解，应用在材料表面的清洗，清洗效果较好，使用方便，安全环保，使用后不仅不会对材料表面有腐蚀伤害，而且可以降低油污的再次产生。

主权项

一种用于油污清洗的微生物制剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）按重量份数计，分别选取15～20份牛肉膏、10～15份蛋白胨、10～15份乳制品废水、5～10份氯化钠、10～15份磷酸氢二钾、2～4份磷酸二氢钾和1～3份硫酸镁制备成固体培养基，将固体培养基在120～125℃下灭菌处理15～20min，灭菌后调节培养基的pH为7.0，分别按接种量3～5%和1～2%将放芽孢杆菌IOS1‑7和假单胞菌HPS2‑5接种到培养基上，并在30～35℃下恒温培养3～5天；（2）分别选取15～20g马铃薯液，6～8g氯化钠，1～3g硫酸锌，18～20g脱脂牛奶和1000～1200mL蒸馏水制备成液体培养基，调节培养基pH值为7.0后在120～125℃灭菌10～15min，先对上述培养后的固体培养基进行划线选取两种菌的单菌落，将单菌落接种到液体培养基中进行富集培养，在27～35℃温度和120～140r/min转速下摇床培养2～4天；（3）将上述培养后的液体培养基在1000～1200r/min转速下离心分离15～20min，收集菌体，将菌体加入不同浓度的油污进行驯化培养，先在2～3mL/L浓度下驯化3～5天，驯化后置于4～6mL/L浓度下驯化3～5天，再分别在8～10mL/L和12～15mL/L驯化5～7天，驯化结束后即可得到能够降解油污的菌体，将菌体用营养液配置成浓度为4.5×10⁷～6.3×10⁷的菌液；所述的不同浓度的油污是通过二氯甲烷进行稀释；（4）按重量份数计，分别选取20～25份上述制备的菌液，10～15份甲壳素，8～10份氨基酸，2～4份尿素，15～20份玉米粉，8～10份甘油和80～90份蒸馏水，放入混合机内，混合搅拌30～40min，得混合液后放入恒温箱中在45～50℃下发酵5～7天，发酵结束后分离得发酵液即为油污清洗剂。