[发明专利]一种以银耳子实体制备植物基透明质酸的方法

摘要

本发明公开了一种以银耳子实体制备植物基透明质酸的方法，属于透明质酸制备技术领域。本发明取银耳子实体洗涤后，用去离子水浸泡，碾磨、微波加热得预处理浆料，再取葡萄皮粉碎后，放入马铃薯蔗糖培养基培养，用去离子水淋洗，得混合微生物淋洗液，与预处理浆料、蔗糖混合发酵后，加入纤维素酶、磷酸二氢钾溶液等混合，加热反应过滤得滤液，浓缩得浓缩液，与无水乙醇混合，经冷藏、离心得沉淀物，将其真空冷冻干燥碾磨制得植物基透明质酸。本发明的有益效果是：本发明制备步骤简单，提取率高于其他方法31.2%以上，制备周期短；产品易存放、透光率好，相对分子量提高了25～31%。

主权项

一种以银耳子实体制备植物基透明质酸的方法，其特征在于具体制备步骤为：（1）称取80～100g银耳子实体，用去离子水洗涤3～5次后，放入盛有500～600mL去离子水的烧杯中，浸泡1～2h后，置于石磨磨盘上研磨，研磨过程中混入120～180mL去离子水，得银耳浆料，再将其转入微波加热器中，以500～600W功率，微波加热15～25min，移出，静置，使其自然冷却至室温，得预处理浆料；（2）称取10～20g葡萄皮，放入组织粉碎机中粉碎，将粉碎后的葡萄皮置于马铃薯蔗糖培养基中，再移入35～45℃恒温培养箱中，培养2～3天，用60～80mL去离子水淋洗培养基表面，得混合微生物淋洗液，随后量取10～20mL所得混合微生物淋洗液，将其转入盛有100～150mL上述所得预处理浆料的发酵罐中，再加入6～8g蔗糖，用灭菌木棍搅拌10～15min后，发酵处理6～8h，得发酵浆料；（3）向反应釜中依次加入20～30mL上述所得发酵浆料，100～200mL质量浓度为8～10%磷酸二氢钾溶液，2～4g纤维素酶，1～3g果胶酶和1～3g中性蛋白酶，启动搅拌器，设定转速为400～600r/min，加热升温至45～50℃，恒温搅拌反应60～80min，随后以80～85℃加热处理5～10min，静置，自然冷却至室温后，过滤除去滤渣，得滤液；（4）将上述所得滤液转入旋转蒸发器中，在70～80℃条件下旋蒸浓缩至原体积的1/3，再将浓缩液转入盛有200～300mL无水乙醇的烧杯中，用玻璃棒搅拌3～5min，搅拌后再将其转入2～4℃冰箱中冷藏10～15h，离心除去上清液，将所得沉淀物转入‑35～‑25℃真空冷冻干燥机中，干燥2～4h后，用研钵研磨成粉，即得植物基透明质酸。