[发明专利]一种固定化酶的制备及水解薯蓣皂素的方法

摘要

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种固定化酶的制备及水解薯蓣皂素的方法。包括将干黄姜原料粉碎、加水浸泡、酶解去杂质、提取薯蓣皂苷、固定化酶制剂组合物水解薯蓣皂苷为薯蓣皂素、航空煤油提取、成品，本发明利用固定化酶技术，将市售价格昂贵的鼠李糖苷酶和β‑葡萄糖苷酶成功的应用于附加值较低的工业产品。本发明利用生物方法替代传统酸解薯蓣皂苷显著降低环境污染，本发明方法反应条件温和，成本低。

主权项

一种固定化酶的制备及水解薯蓣皂素的方法，包括以下步骤：(1)将100kg干黄姜原料粉碎，过20目筛，加入到300kg～500kg中，将生料淀粉酶、普鲁兰酶、真菌α‑淀粉酶加入上述溶液中酶解；(2)将步骤(1)中的黄姜水溶液在自然温度下酶解24h；(3)将步骤(2)进行固液分离，固体用体积分数为75％的乙醇100L提取薯蓣皂苷，提取3次，每次30min,液体可用于制造酒精；(4)制备固定化酶制剂组合物：将高分子化合物载体加水配制成2g/L浓度的溶液，在温度为10℃的条件下搅拌，使其溶解；然后加入与高分子化合物载体质量比为1:30～1:60的酶，搅拌均匀，置于10℃的恒温摇床上，震荡1h；将上述混合液逐滴滴入3mol/L的氯化钙溶液中，在2℃条件下静置10min，使其凝胶固化，收集凝胶小球，并用0.4mol/L的葡萄糖洗涤，抽滤除去游离水分，收集得到的凝胶小球即为固定化酶；(5)将步骤(3)提取的薯蓣皂苷用步骤(4)制备的固定化酶制剂组合物进行酶解，产生薯蓣皂素粗品；(6)将步骤(5)的薯蓣皂素用航空煤油进行提取，得到含量为98％以上的纯薯蓣皂素。