[发明专利]一种化学发光免疫分析仪试剂盒的制备

摘要

本发明公开了一种化学发光免疫分析仪试剂盒的制备，所述重氮化原料的质量组成，所述形成CLEN‑BSA和HRP‑CLEN后进行偶联物的鉴定，可以确定并提高合成产物的偶联比，所述中试剂盒组装后按规定方法抽样检测，可以确保生产的试剂盒的有消息，该化学发光免疫分析仪试剂盒，以CLEN为目标检测物标记HRP并配以鲁米诺作为发光底物，减少了基质效应的影响同时极大的提高了线性检测范围及灵敏度，市场潜力巨大，前景广阔。

主权项

一种化学发光免疫分析仪试剂盒的制备，其特征在于，包括如下步骤：(1)盐酸克伦特罗(CLEN)的重氮化取盐酸克伦特罗，加入1mol·L^‑1HCL和蒸馏水于反应器中，同时将pH调节至0.4‑0.6，然后，往其中连续缓慢加入0.2mol·L^‑1Na NO2，并搅拌50‑70min；(2)盐酸克伦特罗(CLEN)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联将牛血清白蛋白溶于磷酸盐缓冲液中，边搅拌边将重氮化的盐酸克伦特罗缓慢加入其中，形成反应体系，加入过程中用1mol·L^‑1Na OH调节p H值，滴加完成后，将反应体系置于4℃下，调节转速进行反应，形成反应液，反应结束后反应液于4℃下，0.01mol·L^‑1p H＝7的磷酸盐缓冲液中透析2‑4d，转入容器中静止3‑5h后离心，形成CLEN‑BSA；(3)盐酸克伦特罗(CLEN)与辣根过氧化物酶(HRP)的偶联将辣根过氧化物酶溶于磷酸盐缓冲液中，边搅拌边将重氮化的盐酸克伦特罗缓慢加入其中，形成反应体系，加入过程中用1mol·L^‑1Na OH调节p H值，滴加完成后，将反应体系置于4℃下，调节转速进行反应，形成反应液，反应结束后反应液于4℃下，0.01mol·L^‑1p H＝7的磷酸盐缓冲液中透析2‑4d，转入容器中静止3‑5h后离心，形成HRP‑CLEN；(4)多克隆抗体制备将CLEN‑BSA与弗氏佐剂混合后，以皮下多位点注射方式免疫雌性新西兰兔，接着取全血并分离血清，用正辛酸‑饱和硫酸铵法提取抗体，然后将抗体加甘油于‑20℃保存备用；(5)CLEN标准溶液的制备确定抗体和HRP‑CLEN的最佳稀释度，配制40.000ng/m L CLEN标准溶液；(6)试剂盒组装将CLEN标准溶液(40μg/m L)、HRP‑CLEN、底物液、终止液、浓缩洗涤液和多克隆抗体加入到抗体包被的发光板条中，即得到成品。