[发明专利]一种叶酸靶向的多功能超支化聚乙烯亚胺负载阿霉素的方法

摘要

本发明涉及一种叶酸靶向的多功能超支化聚乙烯亚胺负载阿霉素的方法，在PEI溶液中先加入活化后的mPEG‑COOH溶液，再加入活化后的FA‑PEG‑COOH溶液，搅拌反应得到PEI‑mPEG‑(PEG‑FA)；然后在PEI‑mPEG‑(PEG‑FA)溶液中加入FI溶液避光搅拌反应最后加入三乙胺、乙酸酐搅拌，透析冷冻干燥得到FA‑mPEI；在FA‑mPEI的水溶液中加入预先脱酸的阿霉素·盐酸盐DOX·HCl，避光敞口搅拌，然后离心、选取上清液，干燥，即得；本发明采用价廉易得的PEI为基础载体，FA为靶向试剂，降低了材料的成本，对生物体无不良影响，制备方法简单，条件温和，易于操作，具有良好的前景。

主权项

一种叶酸靶向的多功能超支化聚乙烯亚胺负载阿霉素的方法，包括：(1)在超支化聚乙烯亚胺PEI溶液中逐滴加入EDC/NHS活化后的mPEG‑COOH溶液，搅拌反应60‑80h，透析，冷冻干燥，得到PEI‑mPEG；其中EDC与mPEG‑COOH的摩尔比为8‑12:1；NHS与mPEG‑COOH的摩尔比为8‑12:1；mPEG‑COOH与PEI的摩尔比为15‑25:1；(2)将EDC/NHS活化后的叶酸FA溶液加入NH₂‑PEG‑COOH溶液中，搅拌反应60‑80h，透析，冷冻干燥，得到FA‑PEG‑COOH；其中EDC与NH₂‑PEG‑COOH的摩尔比为1.5‑2.1:1；NHS与NH₂‑PEG‑COOH的摩尔比为1.5‑2.1:1；FA与NH₂‑PEG‑COOH的摩尔比为2.2‑2.8:1；(3)将PEI‑mPEG溶液中逐滴加入EDC/NHS活化后的FA‑PEG‑COOH溶液，搅拌反应60‑80h，再逐滴加入异硫氰酸荧光素FI溶液，搅拌反应20‑30h，透析，冷冻干燥，得到PEI‑FI‑mPEG‑(PEG‑FA)；其中EDC与FA‑PEG‑COOH摩尔比为8‑12:1；NHS与FA‑PEG‑COOH的摩尔比为8‑12:1；FA‑PEG‑COOH与PEI‑mPEG的摩尔比为8‑12:1；FI与PEI‑mPEG的摩尔比为5‑7:1；(4)将PEI‑FI‑mPEG‑(PEG‑FA)的水溶液中加入三乙胺，搅拌20‑40min，再加入乙酸酐，继续搅拌20‑30h，透析，冷冻干燥，得到FA靶向的多功能PEI，标记为FA‑mPEI；其中三乙胺与PEI的摩尔比为2800‑3500:1；乙酸酐与PEI的摩尔比为2500‑3000:1；(5)将盐酸阿霉素DOX·HCl溶于甲醇溶液中，加入三乙胺，然后逐滴加入到FA‑mPEI水溶液，避光敞口搅拌12‑24小时，离心，冷冻干燥，得到叶酸靶向的多功能超支化聚乙烯亚胺负载阿霉素的药物缓释体系FA‑mPEI/DOX；其中FA‑mPEI与盐酸阿霉素DOX·HCl的摩尔比为1:8‑20；其中三乙胺与甲醇的体积比为1:30‑80。