[发明专利]一种可溶性碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白表达载体及其应用

摘要

本发明公开了一种可溶性碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白表达载体及其应用，所述表达载体克隆区上游包含人类游离脂肪酸结合蛋白(FABP6)的编码序列，下游为人类碱性成纤维细胞生长因子的编码序列，两个基因的编码区之间包含一段柔性接头编码序列，FABP6的氨基端包含His‑Tag标签编码序列。本发明提供了一种新型碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白表达载体，其特点是：1)可溶性蛋白与包涵体蛋白的比值大于70％；2)容易借助组氨酸标签(His‑Tag)亲和纯化获得目标蛋白。

主权项

一种可溶性碱性成纤维细胞生长因子融合蛋白，其特征在于是如下(1)或(2)的蛋白质：(1)由脂肪酸结合蛋白FABP和碱性成纤维细胞生长因子蛋白融合得到的融合蛋白；所述的脂肪酸结合蛋白FABP是FABP1～FABP9中的任意一种或亚种，所述FABP1～FABP9的氨基酸序列如下所示：所述的FABP1为氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示的蛋白质；所述的FABP1‑1为氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示的蛋白质；所述的FABP1‑2为氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示的蛋白质；所述的FABP2为氨基酸序列如SEQ ID NO：4所示的蛋白质；所述的FABP3为氨基酸序列如SEQ ID NO：5所示的蛋白质；所述的FABP4为氨基酸序列如SEQ ID NO：6所示的蛋白质；所述的FABP5为氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示的蛋白质；所述的FABP6为氨基酸序列是SEQ ID NO：8第2～127位氨基酸残基所示的蛋白质；所述的FABP7为氨基酸序列如SEQ ID NO：9所示的蛋白质；所述的FABP8为氨基酸序列如SEQ ID NO：10所示的蛋白质；所述的FABP9为氨基酸序列如SEQ ID NO：11所示的蛋白质；或者，为将SEQ ID NO：1～11所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由其衍生的蛋白质；所述碱性成纤维细胞生长因子蛋白为氨基酸序列如SEQ ID NO：12所示的蛋白质，或者为将SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由其衍生的蛋白质；所述的脂肪酸结合蛋白FABP和碱性成纤维细胞生长因子蛋白通过柔性接头连接；(2)将(1)的N端连接组氨酸标签得到带标签融合蛋白。