[发明专利]盐生草不同组织盐分含量直接观察的方法

摘要

本发明涉及盐生草不同组织盐分含量的直接观察方法。具体地说利用是扫描电镜结合利用能量色散X射线光谱仪对叶片肉质化盐生植物根、茎、叶片等组织器官剖面含盐分(主要指Na⁺)组成进行定性与定量分析的方法。其过程主要包括盐生草根、茎、叶组织样品的采集、琼脂包埋、剖面切割、液氮冷冻干燥、剖面电镜扫描和X‑ray元素组成进行定性和定量分析等过程。本发明方法对不同组织盐分含量观察结果准确、直观、可靠性强，对当前盐生植物耐盐机理研究和利用盐生植物富集盐分的特性进行盐碱地土壤改良具有重要的现实意义。

主权项

一种盐生草不同组织盐分含量直接观察的方法，其特征在于步骤如下：(1)样品采集：以NaCl胁迫培养1‑2月的盆栽盐生草幼苗为对象，首先从花盆中取出盐生草单株，用超纯水冲洗干净植株，依次分离根、茎、叶片组织，并用双面刀片切成切断；(2)琼脂包埋切割：用质量分数3‑5％的琼脂在3min之内包埋步骤(1)所获得根、茎、叶片切断，室温静置3‑5min，待琼脂凝固好后，用双面刀片在1‑2min之内将包埋好的材料切成切片；(3)液氮冷冻：将步骤(2)获得的材料切片在1min之内投入液氮中进行瞬间冷冻，直至材料冷冻完全；(4)冷冻干燥：将步骤(3)冷冻完全的样品置于冷冻干燥机当中，用温度‑50℃，压强20‑75pa，冷冻干燥时间16‑24h，直至样品冷冻干燥完全；(5)切面电镜扫描和元素组成分析：将步骤(4)获得的样品置于电镜载物台，用扫描电镜扫描剖面，并用能量色散X射线光谱仪进行样品剖面元素组成与含量分析。