[发明专利]同时鉴定弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒的新方法有效
| 申请号: | 201610387434.0 | 申请日: | 2016-06-02 |
| 公开(公告)号: | CN106093427B | 公开(公告)日: | 2018-04-13 |
| 发明(设计)人: | 孙红柳;王巧云 | 申请(专利权)人: | 滨州医学院 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/569;G01B11/06 |
| 代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司37221 | 代理人: | 董洁 |
| 地址: | 264003 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | 本发明公开了同时鉴定弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒的新方法,(1)制备鉴定芯片;(2)将待鉴定溶液注入到步骤(1)中鉴定芯片的检测位点内,待鉴定溶液中的抗体分子与所述鉴定芯片上的抗原分子特异性结合,导致芯片的检测位点表面的分子膜层的厚度或密度发生变化;然后进行冲洗;(3)采用椭偏显微成像仪检测步骤(2)中的所述变化,由此判定待鉴定溶液中是否包含弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒以及获得它们的抗体含量。该方法可以快速、准确同时定性和定量检测和/或鉴定弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒。 | ||
| 搜索关键词: | 同时 鉴定 弓形虫 风疹病毒 单纯 疱疹病毒 新方法 | ||
【主权项】:
蛋白芯片在制备用于同时检测和/或鉴定弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒的试剂盒的应用,其特征是:所述蛋白芯片是通过以下方法制备得到的:在具有羧基表面改性的硅片的检测位点上分别装配弓形虫、风疹病毒和单纯疱疹病毒的抗原,然后进行冲洗;再采用封闭试剂封闭所述检测位点,得到蛋白芯片;羧基改性表面的硅片的制备方法如下:首先采用去离子水冲洗硅片,然后采用氨基硅烷和浓硫酸的混合液浸泡冲洗后的硅片,再采用无水乙醇冲洗浸泡后的硅片,最后采用饱和琥珀酸钠无水乙醇溶液浸泡冲洗后硅片,获得羧基改性表面的硅片;所述氨基硅烷和浓硫酸的体积比为1:3,采用氨基硅烷和浓硫酸的混合液的浸泡时间为30min,所述饱和琥珀酸钠无水乙醇溶液的浸泡时间为2h;在装配探针之前,需要将表面羧基改性的硅片置于微流控检测膜片上,采用微流控芯片加样系统进行点加探针,微流控加样流速为1.5µl/min,用量为10µl,探针浓度为0.1mg/mL;采用7 mg/ml BSA封闭检测位点 ,流速1.5µl/min,采用50µl PBS进行冲洗,冲洗速度为10µl/min。
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