[发明专利]一种耐受有毒产物的细胞固定化方法及其固定化细胞生产1,5-戊二胺工艺

摘要

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种耐受有毒产物的细胞固定化方法及该固定化细胞转化生产1,5‑戊二胺的连续化生产工艺。本申请对聚乙烯醇与海藻酸钠配比及相应的成胶方法进行了研发优化，制备的固定化细胞具有可耐受高浓度1,5‑戊二胺对菌体细胞的损伤、有较好的膨胀性能、可耐受转化过程中大量二氧化碳气体的释放对结构的影响、机械强度高、使用寿命长等优点；并且分批使用6次以后活力保持在98%以上，连续使用12h后活力保持在70%以上。本发明所提供的连续化生产工艺所需设备少，便于操作，生产规模放大容易，自动化程度高。生产过程不添加任何中和剂；产品澄清，分离纯化容易。

主权项

一种耐受有毒产物的细胞固定化方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）冷水加入聚乙烯醇后加热至98℃溶化后，加入海藻酸钠，灭菌锅加热溶化，搅拌冷却至40‑50℃，加入含有细胞保护剂的菌悬液，充分搅拌均匀;（2）用注射器或蠕动泵将步骤（1）所述混合液滴加到交联剂溶液中，形成直径0.3‑0.5 cm的小球，室温静置6‑12 h后，‑45 ~ ‑80℃冷冻8‑16 h;冷冻结束后，室温缓慢融化，用生理盐水洗涤2次，冰箱保存，用于转化。