[发明专利]一种基于核酸适配体标记的重金属汞离子检测方法

摘要

本发明涉及一种基于核酸适配体标记的重金属汞离子检测方法，属于环境分析领域，本发明制备了一种Fe₃O₄/Au核壳结构磁性材料，并对基底表面进行核酸适配体修饰，利用Hg离子与核酸适配体间的T‑Hg‑T效应以及基底的磁性实现了汞离子在实际水样中的富集分离，通过一系列实验证明本发明采用的制备方法及分析方法操作简便，可以实现汞离子的选择性检测。

主权项

1.一种基于核酸适配体标记的重金属汞离子检测方法，其包括如下步骤：(1)用高温分解法与硅酸四乙酯TEOS水解法制得Fe3O4/SiO2纳米颗粒，将50mg Fe3O4/SiO2磁性颗粒分散于100mL 2％的聚二烯丙基二甲基氯化铵PDDA溶液中，在机械搅拌下反应20min，将生成的沉淀物用去离子水清洗后得到PDDA修饰的Fe3O4/SiO2磁性颗粒；(2)Fe3O4/Au磁性颗粒的制备：将0.05g步骤(1)得到的PDDA修饰的Fe3O4/SiO2磁性颗粒分散于200mL Au溶胶，放入摇床，30℃下反应20min，将生成物用去离子水清洗，得到Fe3O4/Au磁性颗粒FA；(3)PBS修饰的FA磁性颗粒制备：将0.015g步骤(2)得到的FA磁性颗粒分散于50mL的PBS溶液中，放入摇床30℃下反应60min，将生成物用PBS清洗后溶于15mL PBS,制得PBS修饰的FA磁性颗粒FA‑PBS；(4)核酸适配体修饰的FA‑PBS磁性颗粒制备：将5mL步骤(3)得到的FA‑PBS磁性颗粒分散于118μL DNA溶液中，放入摇床30℃下反应3h，加入1mL NaCl溶液，培养12h，将生成物用PBS清洗3次后，溶于0.5mL PBS制得核酸适配体修饰的FA‑DNA磁性颗粒；(5)Hg2+的富集与检测：将0.3mg步骤(4)得到的FA‑DNA磁性颗粒分散于Hg2+溶液中富集一定时间后，用外加磁场对磁性颗粒进行收集，使用拉曼光谱仪进行信号采集。