[发明专利]一种体外扩增NK细胞的方法及其获得的NK细胞在审
| 申请号： | 201610331306.4 | 申请日： | 2016-05-18 |
| 公开（公告）号： | CN105754942A | 公开（公告）日： | 2016-07-13 |
| 发明（设计）人： | 鲁振宇;韩洪起;刘俊江;张冰晶;秦臻;徐悦;黄文敬 | 申请（专利权）人： | 天津普瑞赛尔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 天津才智专利商标代理有限公司 12108 | 代理人： | 王晓红 |
| 地址： | 300392 天津市南开区滨海高新区*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种体外扩增NK细胞的方法及其获得的NK细胞，以外周血中分离出的单个核细胞(PBMC)作为种子细胞，通过在诱导培养开始及每次扩大培养时，将细胞加入到预先包被CD16Mab的培养瓶中，对细胞进行连续刺激并最终制备大量高纯度NK细胞的方法以及获得的NK细胞。本发明在不使用滋养层细胞进行刺激的情况下，通过CD16Mab包被进行连续刺激的方法最终获得大量、高纯度的NK细胞，并且降低了细胞因子的使用量。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体外 扩增 nk 细胞 方法 及其 获得 | ||
【主权项】：
一种体外扩增NK细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)以外周血中分离获得的单个核细胞PBMC作为种子细胞；2)配制NK细胞完全培养基：含有体积分数5‑8％的FBS，以及终浓度500‑1000IU/ml的IL‑2、终浓度20‑100IU/ml的IL‑12、终浓度20‑100IU/ml的IL‑15的免疫细胞培养基；3)以NK细胞完全培养基配制CD16Mab包被液：NK细胞完全培养基中含有4‑8ug/ml的CD16Mab；4)在细胞培养瓶中加入1‑5mlCD16Mab包被液，包被4‑24h；5)将单个核细胞按照3‑8*105/ml的细胞终浓度接种到预包被CD16Mab的细胞培养瓶中，加入NK细胞诱导培养基以及终浓度500‑1000IU/ml的IFN‑r,诱导扩增NK细胞；6)每3‑4天将每瓶细胞悬液平均分配到2个以CD16Mab包被液预包被4‑24h的细胞培养瓶中，并补加1‑2倍体积的NK细胞诱导培养基；7)培养的第19‑20天收集所有细胞培养瓶中的全部细胞。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津普瑞赛尔生物科技有限公司，未经天津普瑞赛尔生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201610331306.4/，转载请声明来源钻瓜专利网。
