[发明专利]一种金属纳米颗粒离子和纳米效应毒性贡献率的估算方法

摘要

一种金属纳米颗粒离子和纳米效应毒性贡献率的估算方法，属于人工金属纳米颗粒毒性效应评价领域，选择海洋中的贝类血淋巴细胞为实验对象，根据金属纳米颗粒释放的金属离子含量，设定含有金属离子或纳米颗粒的细胞培养基为两个实验组，研究离子效应和纳米效应对其毒性得贡献率。本发明首次将金属纳米颗粒的纳米效应和离子效应分别进行研究，选择海洋底栖生物免疫系统的血淋巴细胞为实验对象，该细胞对污染物胁迫十分敏感。同时选择多项生理指标将研究水平推进到分子免疫水平，提高了人工金属纳米颗粒毒性效应评价的有效性和准确性。

主权项

一种金属纳米颗粒离子和纳米效应毒性贡献率的估算方法，其特征在于它的具体步骤包括如下：⑴实验对象的选择:选择当地分布广泛、容易采集、体积适中的一种贝类生物，采集后抽取血淋巴细胞进行体外培养用于后续实验；⑵24h LC50值：设定一系列实验浓度梯度测定金属纳米颗粒对血淋巴细胞的24h致死率以确定LC50值，以此作为参考选择低于LC50的金属纳米颗粒浓度作为胁迫组浓度CNPs；⑶金属纳米颗粒离子释放量的测定：配置血细胞培养基，在血细胞培养基中加入CNPs金属纳米颗粒，测定金属纳米颗粒的金属离子释放达到稳定后的浓度，以此作为浓度参考设定后续胁迫实验中采用的金属离子浓度CNPion；⑷血淋巴细胞免疫系统各项指标的测定：采用含有CNPs金属纳米颗粒或CNPion释放金属离子的实验液分别胁迫血淋巴细胞24h，然后分别测定其血淋巴细胞DNA损伤量、细胞吞噬能力、细胞膜破损率、溶酶体释放量的变化情况；⑸用整合生物标志物法获得血淋巴细胞的整体响应值；⑹离子效应和纳米效应贡献率的计算公式：CRion=IBRionIBRNPs×100%,CRpartical=(1-IBRionIBRNPs)×100%;]]>其中，IBRion为金属离子胁迫组获得的响应值，IBRNPs为金属纳米颗粒胁迫组获得的响应值，CRion为离子效应贡献率，CRparticle为纳米效应贡献率。