[发明专利]三黄方制剂成分检测方法及指纹图谱构建方法

摘要

本发明属于药物分析领域，涉及一种中药指纹图谱的测定方法，本发明公开了一种三黄方制剂成分检测方法，将供试品溶液注入UPLC‑Q‑TOF‑MS联用仪，以UPLC‑Q‑TOF‑MS法采用梯度洗脱进行测定，根据UPLC‑Q‑TOF‑MS联用仪检测结果，获得三黄方制剂的成分。本发明还公开了利用上述三黄方制剂成分检测方法，取不同批次的三黄方制剂供试品溶液按上述的方法进行检测，根据检测结果，标定共有峰，建立了三黄方制剂超高效液相色谱‑高分辨‑飞行时间质谱联用指纹图谱。该方法和指纹图谱可作为三黄方制剂质量控制与分析的有效方法之一。

主权项

1.一种三黄方制剂成分检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：供试品溶液的制备取黄芪、黄连、泽泻、生蒲黄和茵陈，用水和乙醇进行浓缩处理，得到供试品溶液；步骤2：供试品溶液的测定吸取供试品溶液注入UPLC‑Q‑TOF‑MS联用仪，以UPLC‑Q‑TOF‑MS法采用梯度洗脱进行测定，根据UPLC‑Q‑TOF‑MS联用仪检测结果，获得三黄方制剂的成分；其中，所述的步骤1具体包括以下步骤：步骤a：将黄芪、黄连、泽泻、生蒲黄和茵陈用纯化水浸泡后，再加入纯化水同煮，然后滤取药液并浓缩处理得到浓缩药液；步骤b：往步骤a得到的浓缩药液中加入乙醇搅拌均匀后，常温沉淀24小时，然后取上清液回收乙醇并进行浓缩处理，再次取上清液回收乙醇并进行浓缩处理，得到浓缩液；步骤c：往步骤b得到的浓缩液中加入水搅拌均匀后，沉淀24小时，然后将上清液进行浓缩处理，定容得到供试品溶液；所述步骤2中UPLC‑Q‑TOF‑MS联用仪的指纹图谱检测条件：色谱条件：分析柱为ACQUITY UPLCTM BEH C18柱，进样量2μL，流速0.4mL/min，柱温45℃，梯度洗脱：A为0.1％v/v的甲酸溶液，B为含0.1％v/v甲酸的乙腈溶液，梯度变化情况如下：0–0.5min，5％B；0.5–4min，5–20％B；4–6min，20–25％B；6–8min，25–50％B；8–12.5min，50–85％B；12.5–13.5min，85–100％B；13.5–15min，100％B；15–15.5min，100–5％B；15.5–17min，5％B；质谱条件：电喷雾离子源，全扫描数据设置为100‑1000Da，间隔时间为0.02s，扫描秒时间为0.3s，毛细管电压为阳离子模式3000V和阴离子模式2800V，脱溶剂温度为350℃，样品锥电压为阳离子模式35V和阴离子模式50V，碰撞能量为4eV，提取锥电压为4.0V，源温度为115℃，锥气体流速为50L/h，脱溶剂气流速为600L/h。