[发明专利]一种昆虫病原线虫的固体培养方法

摘要

本发明公开了一种昆虫病原线虫的固体培养方法，其特征在于具体步骤包括(a)制备菌种培养基，将昆虫病原线虫的共生细菌活化，将共生细菌接入菌种培养基；(b)共生细菌菌液接入固体培养基；(c)在固体培养基中培养3‑5天后，再接入昆虫病原线虫悬浮液；(d)黑暗静置培养线虫，培养3周后收获线虫。本发明解决了活体培养方法无法规模化生产昆虫病原线虫的问题，并且固体培养方法的生产成本要明显低于液体培养方法，固体培养方法生产的线虫致病力也要明显高于液体培养方法。市场需求量增大，固体培养方法更具发展前景，对昆虫病原线虫的规模化生产和对地下害虫的生物防治具有非常重要的意义。

主权项

一种昆虫病原线虫的固体培养方法，其特征在于：具体步骤包括：(a)制备菌种培养基，准备将昆虫病原线虫的共生细菌活化，将活化的共生细菌接入菌种培养基中进行培养；所述(a)步骤中，菌种培养基，采用LB培养基，LB培养基组分为：蛋白胨1％，氯化钠0.5％，酵母0.5％，水98％；(b)制备共生细菌菌液，将培养的共生细菌菌液接入装在不锈钢培养盒中的固体培养基中培养；固体培养基采用的配方为：黄豆粉15％，面粉10％，蛋黄粉1％，蛋白胨1％，植物油1％，酵母1％，海绵10％，水61％，固体培养基灭菌后使用，灭菌时间45分钟，灭菌在100～140℃湿热环境下进行；(c)24℃～26℃条件下，共生细菌菌液在固体培养基中培养3‑5天后，再接入昆虫病原线虫悬浮液；(d)在24℃～26℃条件下，黑暗静置培养线虫，培养3周后收获线虫，将线虫连同固体培养物置于筛网中一起浸泡于装有清水的较大容器中，静置分离，再加入清水反复清洗。