[发明专利]一种基于二硫化钼的传感器及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及一种基于二硫化钼的传感器及其制备方法和应用，属于生物医学领域中的蛋白质检测方法；本发明的技术方案主要包括首先制备MoS2‑AuNP复合物；再合成凝血酶的核苷酸适配体；将合成的核苷酸适配体加入到MoS2‑AuNP的水溶液中，再加入Tween80得到混合溶液，室温下反应30min后，将混合溶液在70℃水浴加热2.5h，10000r离心15min，然后将沉淀分散于0.1M PBS中；即制备成为本发明所述的传感器；本发明充分利用MoS2‑‑AuNP淬灭荧光的特性，采用FAM标记的核酸适配体序列与凝血酶特异性结合，通过FAM荧光的淬灭与恢复，能高灵敏度、快速、低成本地实现凝血酶的微量检测，通过加入吐温80，将MoS2‑AuNP‑核酸适配体传感器对凝血酶实际检测限提高至0.4pM。

主权项

一种基于二硫化钼的用于非诊断目的的获得凝血酶含量信息的传感器，其特征在于，所述传感器的检测限为0.4pM；具体的，所述传感器按照以下步骤制备：（1）制备MoS2‑AuNP：将MoS2溶液、金纳米颗粒 AuNP、超纯水混合搅拌均匀，加入乙二醇，在90℃反应5小时，离心后将沉淀分散于超纯水中，避光保存；所述的MoS2溶液、金纳米颗粒 AuNP、超纯水、乙二醇的体积比为10:10:10：12；其中MoS2溶液的浓度为2mg/mL；金纳米颗粒 AuNP的浓度为9nM；（2）合成凝血酶的核苷酸适配体：SH‑5’‑ GG TTG GTG TGG TTG G ‑3’，3’末端标记羧基荧光素（FAM）；（3）传感器合成：将核苷酸适配体加入到MoS2‑AuNP水溶液中，同时加入Tween80，室温反应30min后，将混合溶液在70℃水浴加热2.5 h ，离心，然后将沉淀分散于PBS缓冲液中；即制备成为基于核苷酸适配体共价结合MoS2‑AuN检测凝血酶的传感器；步骤（3）中所述的加入核苷酸适配体的MoS2‑AuNP的水溶液与加入的Tween80的体积比为100：1；其中Tween80的质量百分数为10%；步骤（3）中所述的混合溶液中核苷酸适配体的终浓度为5‑20 nM；MoS2的终浓度为20‑70µg/mL。