[发明专利]一种有效扩增CIK且提高其特异性杀瘤能力的方法

摘要

本发明提供了一种扩增CIK细胞且提高其特异性杀瘤的培养方法，所述的方法包括分离获得单个核细胞，将其转至培养瓶中，加入终浓度为400‑600ng/ml CD3mAb、1400‑1600 ng/ml CD28mAb、4000‑4800IU/ml IFN‑γ、4000‑4800IU/ml IL‑2、140‑160ng/ml IL‑15，第4天补加600‑1000IU/ml IL‑2、20‑30ng/ml IL‑15的新鲜培养液，第6天分瓶培养，第8、9天分别将瓶中的细胞转至1.8L细胞培养袋内，补加600‑1000IU/ml IL‑2、20‑30ng/ml IL‑15的新鲜培养液，第11天将细胞分袋培养补加600‑1000IU/ml IL‑2、20‑30ng/ml IL‑15的新鲜培养液，继续诱导扩增，第15‑21天内收获细胞；将收获的细胞用抗EGFR×抗CD3双功能抗体常温下孵育30‑40分钟后，用生理盐水洗涤后收集细胞，即制成特异性杀瘤的CIK细胞制剂。

主权项

1.一种扩增CIK细胞且提高其特异性杀瘤的培养方法，其特征在于：所述的方法包括分离获得单个核细胞，将其转至培养瓶中，加入CD3mAb、CD28mAb、IFN‑γ、IL‑2、IL‑15，第3、4天分别补加IL‑2和IL‑15，第6天分瓶培养并补加IL‑2和IL‑15，第8、9天分别将瓶中的细胞转至1.8L细胞培养袋内，各自补加IL‑2和IL‑15，第11天将细胞分袋培养补加IL‑2和IL‑15，继续诱导扩增，第15‑21天内收获细胞；将收获的细胞用抗EGFR×抗CD3双特异性抗体常温下孵育30‑40分钟后，用生理盐水洗涤后收集细胞，即制成特异性杀瘤的CIK细胞制剂。