[发明专利]外周血单个核细胞中祛除低密度粒细胞的方法在审
| 申请号： | 201610068790.6 | 申请日： | 2016-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN107022523A | 公开（公告）日： | 2017-08-08 |
| 发明（设计）人： | 张思功 | 申请（专利权）人： | 兰州大学第二医院;张思功 |
| 主分类号： | C12N5/078 | 分类号： | C12N5/078 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 730000 甘*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明涉及外周血单个核细胞中祛除低密度粒细胞的方法，本发明根据淋巴细胞是悬浮细胞，而低密度粒细胞更容易贴壁生长的特点，对分离的外周血单个核细胞在培养板中静置培养1小时，利用低密度粒细胞主动贴壁的特点将低密度粒细胞从外周血单个核细胞中除掉，解决了现有的祛除外周血单个核细胞中低密度粒细胞的方法无法快捷有效地将低密度粒细胞祛除，且过程复杂的问题，本发明工艺简单、易于操作、成本低。 | ||
| 搜索关键词： | 外周血 单个 细胞 祛除 密度 粒细胞 方法 | ||
【主权项】：
外周血单个核细胞中祛除低密度粒细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：第一步，将分离的外周血单个核细胞重悬在未加胎牛血清的RPMI 1640培养基中；第二步，吸取细胞浓度1×105/ml的培养基溶液，放入孔板中，所述的孔板，具体是96孔板或48孔板或24孔板或12孔板或6孔板，选取96孔板时，每孔加入100ul，选取48孔板时，每孔加入300ul，选取24孔板时，每孔加入0.6ml，选取12孔板时，每孔加入1.5ml，选6孔板时，每孔加入3ml；第三步，将孔板放入浓度为5％的CO2细胞培养箱中静置培养1小时；第四步，吸取上清液加入到离心管中，并加入两倍体积的磷酸缓冲盐溶液，放入离心机中离心10分钟；第五步，去除上清液后用RPMI 1640培养基重悬外周血单个核细胞备用。
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