[发明专利]具抗肿瘤活性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂MPGF和MPGH及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了具抗肿瘤活性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR TKI)MPGF和MPGH及其制备方法和应用。本发明通过对PD153035的化学结构进行优化和改进，得到了全新的EGFR TKI，命名为MPGF(式I)和MPGH(式II)，研究表明本发明合成的EGFR TKI—MPGF和MPGH能够有效抑制肿瘤细胞的增殖，与PD153035相比，对突变EGFR肺癌细胞系PC‑9具有更强的抑制增殖作用，因此在临床上可作为抗肿瘤剂应用。此外，本发明还公开了制备所述具抗肿瘤活性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂MPGF和MPGH的方法。本发明的提出为肿瘤治疗，特别是非小细胞肺癌的治疗提供了一种有效的技术手段。

主权项

一种制备式I或式II所示表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂或其可药用的盐的方法，包括：1)氮气保护下在反应瓶中加入10.0g 3‑甲氧基‑4‑羟基苯甲酸，19.0g碳酸钾，7.0g氯化苄和80毫升乙腈，该混合物于90℃回流反应2小时，使用正己烷：乙酸乙酯体积比＝4:1的混合物作为展开剂进行TLC分析；原料完全反应后，冷却抽滤，用150mL乙酸乙酯洗涤滤饼，滤液旋干，进行柱层析分离，使用正己烷：乙酸乙酯体积比＝5:1的混合溶液进行洗脱，得到纯白色固体，即化合物一；2)将53毫升浓硝酸和105毫升醋酸混合后冰浴降温至‑5℃，将14.0g化合物一溶于15ml醋酸中，然后将含有化合物一的醋酸溶液缓慢滴加进浓硝酸和醋酸的混合液中，滴完后反应液升至20‑25℃，反应16小时，进行TLC分析，原料完全反应后，反应液倒入冰水中，用乙酸乙酯萃取，用饱和氯化钠溶液洗涤，将有机相用饱和碳酸氢钠溶液洗涤至碱性，再用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥，抽滤滤液旋干得到白色固体，即化合物二，此产物可以直接用于下步反应；3)氮气保护下将8.0g化合物二，12.0g铁粉，12.0g氯化铵，60ml水，120毫升甲醇混合于75‑85℃回流搅拌30分钟，TLC分析显示无原料，抽滤，用50毫升甲醇和50毫升乙酸乙酯的混合溶液洗涤滤饼，滤液旋去溶剂，加入300毫升水中，用150毫升乙酸乙酯萃取三次，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤后用无水硫酸镁干燥，抽滤旋干得到棕色固体，即化合物三；4)氮气保护下将5.8g化合物三，720mg甲酸铵，60ml甲酰胺混合于160℃回流反应3小时后，冷却析出固体，抽滤，滤饼用水洗涤，干燥得灰白色固体，即化合物四；5)将2.1g化合物四，9.1g三氯氧磷和60ml二氯乙烷混合于85℃回流反应1小时，旋去三氯氧磷，加入冰水，用二氯甲烷萃取，有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸镁干燥，抽滤旋干，进行柱层析分离，依次使用正己烷：乙酸乙酯体积比＝5:1、3:1以及1:1的混合溶液进行梯度洗脱，于正己烷：乙酸乙酯体积比＝1:1的洗脱液中得到类白色固体，即化合物五；6)氮气保护下将2.10g化合物五，3‑氯‑4‑氟苯胺1.10g，异丙醇80ml混合于80‑90℃回流搅拌4‑5小时，冷却抽滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤，干燥后得淡黄色固体3g，向该固体中加入氨水调节pH至碱性，用二氯甲烷萃取，饱和氯化钠洗涤后，无水硫酸镁干燥，旋干得到淡黄色固体，即化合物六；7)氮气保护下将2.4g化合物六溶于100ml甲醇和50mlTHF混合液中，加入1g 5％钯碳，通入氢气20‑25℃搅拌反应2.5h，使用二氯甲烷：甲醇体积比＝10:1的混合溶液作为展开剂进行TLC分析，原料反应完全后，抽滤，滤饼用二氯甲烷和甲醇混合液浸泡洗涤，滤液旋干得到黄色粉末，即化合物七；8)20.0g三缩四乙二醇和10.2g三乙胺加入反应瓶中，加入300ml乙腈，冰浴降温至0‑5℃，将19.0gTsCl溶入100ml乙腈缓慢滴入含有三缩四乙二醇和三乙胺的乙腈溶液中，1h滴完，滴完后升至20‑25℃下反应12‑14h，旋去溶剂，进行柱层析分离，依次使用正己烷：乙酸乙酯体积比＝4:1以及1.5:1的混合溶液进行梯度洗脱，于正己烷：乙酸乙酯体积比＝4:1的洗脱液中得到油状产品，即化合物十三，于正己烷：乙酸乙酯体积比＝1.5:1的洗脱液中得到油状物，即化合物十四；9)式II所示化合物的制备：氮气保护下，将1.50g化合物七，8.00g碳酸钾，120ml乙腈混合，升温至90‑98℃搅拌，将含有1.60g化合物十三的20ml乙腈溶液滴加进入该含有化合物七的混合物中，30‑60min加完，加毕于95℃继续反应1h，使用二氯甲烷：甲醇体积比＝20:1的混合溶液作为展开剂进行TLC分析，原料反应完全后，冷却抽滤，用二氯甲烷洗涤滤饼，滤液旋干过柱，依次使用二氯甲烷：甲醇体积比＝40:1、30:1以及20:1的混合溶液进行梯度洗脱，于二氯甲烷：甲醇体积比＝20:1的洗脱液中得到油状产物1.7g，制备色谱分离后得到纯产品，即式II所示的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂；10)式I所示化合物的制备：氮气保护下将0.50g式II所示的化合物溶入20mL二氯甲烷中，降温至‑5℃加入0.24g三乙胺和0.12g DMAP，于‑10℃加入0.93g TsCl，搅拌反应5‑10min后撤去冰浴，自然升至20‑25℃反应3h，使用二氯甲烷：甲醇体积比＝20:1的混合溶液作为展开剂进行TLC分析，原料基本反应完全后，旋去溶剂后快速柱层析分离，依次使用二氯甲烷：甲醇体积比＝50:1、40:1以及30:1的混合溶液进行梯度洗脱，于二氯甲烷：甲醇体积比＝30:1的洗脱液中得类白色固体，将产物溶于二氯甲烷中，加入1mL 3.5M HCl/乙醇溶液成盐，旋去溶剂得到白色固体，即化合物九；11)氮气保护下将3.60g化合物十四和0.85g氟化钾，2.70g氨基聚醚K222以及30ml乙腈混合于90℃回流反应5h，旋干乙腈，加入乙酸乙酯，用饱和氯化钠溶液洗涤，干燥旋干后进行柱层析分离，依次使用正己烷：乙酸乙酯体积比＝3:1、2:1以及1:1的混合溶液进行梯度洗脱，于正己烷：乙酸乙酯体积比＝1:1的洗脱液中得到油状产品；12)氮气保护下将0.48g化合物九，2.76g碳酸钾，20ml乙腈混合加热至回流，将0.55g步骤11)得到的油状产品溶入10ml乙腈中缓慢滴入上述含有化合物九的混合液中，20‑30min加完，继续回流2h，使用二氯甲烷：甲醇体积比＝20:1的混合溶液作为展开剂进行TLC分析，原料基本反应完全后，冷却抽滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，旋干，进行柱层析分离，依次使用二氯甲烷：甲醇体积比＝30:1以及20:1的混合溶液进行梯度洗脱，于二氯甲烷：甲醇体积比＝20:1的洗脱液中得到白色固体470mg，制备色谱分离，用乙酸乙酯和正己烷结晶得到白色晶体，即式I所示的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂；