[发明专利]一种适用于现场检测的可卡因快速定量检测方法

摘要

本发明公开一种适用于现场检测的可卡因快速定量检测方法，包括以下步骤：(1)制备纸基检测装置：选取纸张作为检测基底，以疏水壁垒在纸张表面圈定亲水检测区域，共价偶联水溶性上转换荧光纳米材料和适配体ACA‑1；(2)选取金纳米颗粒并在其表面修饰适配体ACA‑2，得到AuNPs‑ACA‑2溶液；(3)AuNPs‑ACA‑2溶液的浓度优化；(4)配制可卡因的标准溶液；(5)绘制可卡因检测标准曲线；(6)待测体液中可卡因浓度的测定。本发明解决了可卡因检测领域亟待解决的快速定量检测的问题，实现了体液样品中可卡因浓度的快速、定量、高灵敏检测，定量检测灵敏度可达0.05μM。

主权项

1.一种适用于现场检测的可卡因快速定量检测方法，其特征在于包括以下步骤：(1)制备纸基检测装置：选取纸张作为检测基底，以非水溶性溶剂作为疏水壁垒在纸张表面圈定亲水检测区域，将水溶性上转换荧光纳米材料和单链核酸适配体ACA‑1共价偶联在所述亲水检测区域，得到纸基检测装置；(2)选取金纳米颗粒并在其表面修饰单链核酸适配体ACA‑2，所得产物记作AuNPs‑ACA‑2，将其分散于缓冲溶液中，得到AuNPs‑ACA‑2溶液；(3)AuNPs‑ACA‑2溶液的浓度优化：分别在步骤(1)所述的纸基检测装置的亲水检测区域中加入体积为V1固定浓度的可卡因溶液和体积为V2不同浓度的AuNPs‑ACA‑2溶液，反应完成后除去未反应的AuNPs‑ACA‑2；将所得反应后的纸基检测装置干燥后用980nm激光光源激发，于黑暗条件下拍摄亲水检测区域的荧光图像并用软件读取荧光图像中绿光强度F；设定AuNPs‑ACA‑2溶液的浓度为0时，所得绿光强度空白样强度记为F0，计算不同浓度AuNPs‑ACA‑2溶液所对应的荧光猝灭效率(F0‑F)/F0，得到荧光猝灭效率最大时所对应的AuNPs‑ACA‑2溶液浓度C；(4)配制可卡因的标准溶液：用体液配制不同浓度的可卡因溶液，即为可卡因标准溶液；(5)绘制可卡因检测标准曲线：分别在步骤(1)所述的纸基检测装置的亲水检测区域中加入体积为V1的可卡因标准溶液和体积为V2浓度为C的AuNPs‑ACA‑2溶液，反应完成后除去未反应的AuNPs‑ACA‑2；将所得反应后的纸基检测装置干燥后用980nm激光光源激发，于黑暗条件下拍摄亲水检测区域的荧光图像并用软件读取荧光图像中绿光强度F’；设定可卡因标准溶液的浓度为0时，所得绿光强度空白样强度记为F0’，以荧光猝灭效率(F0’‑F’)/F0’为纵坐标，以可卡因标准溶液浓度的对数值为横坐标绘制标准曲线；(6)待测体液中可卡因浓度的测定：分别在步骤(1)所述的纸基检测装置的亲水检测区域中加入体积为V1的待测体液和体积为V2浓度为C的AuNPs‑ACA‑2溶液，反应完成后除去未反应的AuNPs‑ACA‑2；将所得反应后的纸基检测装置干燥后用980nm激光光源激发，于黑暗条件下拍摄亲水检测区域的荧光图像并用软件读取荧光图像中绿光强度Fx；计算荧光猝灭效率(F0’‑Fx)/F0’，代入标准曲线得到待测体液中的可卡因浓度。