[发明专利]一种球化酶技术固定化腈水合酶的方法在审
| 申请号： | 201610035437.8 | 申请日： | 2016-01-20 |
| 公开（公告）号： | CN105505910A | 公开（公告）日： | 2016-04-20 |
| 发明（设计）人： | 高静;姜艳军;牟海霞;贺莹 | 申请（专利权）人： | 河北工业大学 |
| 主分类号： | C12N11/00 | 分类号： | C12N11/00 |
| 代理公司： | 天津翰林知识产权代理事务所(普通合伙) 12210 | 代理人： | 赵凤英 |
| 地址： | 300130 天津市红桥区*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明为一种球化酶技术固定化腈水合酶的方法，该方法包括以下步骤：（1）向腈水合酶溶液中加入保护剂PLL，混合均匀作为水相；另向正己烷中加入表面活性剂span-80，混合均匀作为油相；再把水相和油相混合搅拌制成粗乳液；（2） 将上步得到的粗乳液在5~ 30kpa的跨膜压力下通过SPG膜乳化器，待粗乳液完全通过SPG膜后，即得到W/O型（油包水）乳液，然后向该乳液中滴加交联剂戊二醛，在4oC下交联0.5～4h，离心洗涤，即可得到球形腈水合酶粒子。本发明的制备工艺简单，条件温和，酶活回收率在50%以上。重复使用10次后，酶活还可达到初始酶活的45%左右。同游离酶相比，储藏稳定性也更好。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 球化酶 技术 固定 水合 方法 | ||
【主权项】：
一种球化酶技术固定化腈水合酶的方法，其特征为包括以下步骤：（1） 向腈水合酶溶液中加入保护剂PLL，混合均匀作为水相；另向正己烷中加入表面活性剂span‑80，混合均匀作为油相；再把水相和油相混合搅拌制成粗乳液；其中，腈水合酶溶液的浓度为0.1~ 0.5 g/mL，PLL的质量为腈水合酶溶液质量的1% ~ 3%； span‑80的质量为正己烷质量的1% ~ 5%；体积比为水相：油相＝1：3～9；（2） 将上步得到的粗乳液在5 ~ 30 kpa的跨膜压力下通过SPG膜乳化器，待粗乳液完全通过SPG膜后，即得到W/O型（油包水）乳液，然后向该乳液中滴加交联剂戊二醛，在4 oC下交联0.5～4 h，离心洗涤，即可得到球形腈水合酶粒子；其中，体积比戊二醛：W/O型乳液＝1：60～90。
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