[发明专利]一种提高大豆的转基因频率的方法在审
申请号: | 201610031381.9 | 申请日: | 2016-01-18 |
公开(公告)号: | CN106978435A | 公开(公告)日: | 2017-07-25 |
发明(设计)人: | 朱木兰;卫志明 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海生命科学研究院 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H5/00 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 200031 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
权利要求书: | 暂无信息 | 说明书: | 暂无信息 |
摘要: | 本发明涉及一种提高大豆的转基因频率的方法。本发明改进传统的大豆转基因抗性芽的离体生根方法,提出了一种全新的高效离体生根方法——带胚轴生根法,成功获得了大豆转基因植株。本发明的方法可大幅提高大豆遗传转化频率。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 大豆 转基因 频率 方法 | ||
【主权项】:
一种培育转基因大豆的方法,其特征在于,所述方法包括:(a)将大豆种子灭菌处理,浸泡使大豆种子吸涨,获得大豆种子的胚尖,进行预培养;(b)将步骤(a)的胚尖在经活化的农杆菌中浸染;所述的农杆菌携带重组质粒,所述的重组质粒包含有外源基因;(c)将步骤(b)浸染后的胚尖培养3‑6天后,筛选培养携带外源基因的胚尖;筛选培养,获得带有不定芽的胚尖,该不定芽携带外源基因;抹除部分芽,保留2‑3个健壮的不定芽;(d)步骤(c)的带有不定芽的胚尖培养12‑18天后,在赤霉素和多效唑溶液中浸泡,再转接到含6‑苄氨基腺嘌呤和赤霉素的MS基本培养基中培养,从而不定芽生长,出现主茎;(e)将步骤(d)的小植株进行生根培养,使不定芽随同胚轴生根;和(f)将步骤(e)的小植株的一个胚轴上的多个大豆转基因株系移栽到土壤,继续培养,获得转基因大豆植株。
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