[发明专利]一种红豆杉的杂交育种方法

摘要

本发明公开了一种红豆杉的杂交育种方法，包括如下步骤花粉采集、授粉、施肥、挂果、沙藏、播种、移栽。本发明方法解决红豆杉属植株种间花期不同步导致授粉育种困难的问题，简便易行，且采用喷施的方式进行大量的生产实践。该发明对于红豆杉属植物资源的深度开发和广泛应用具有重要而深远的意义，应用前景广阔。

主权项

一种红豆杉的杂交育种方法，其特征在于，所述方法的具体操作步骤为：（1）花粉采集：于2月份，分别采集南方红豆杉和曼地亚红豆杉的雄株的花粉，自然干燥，剔除杂质后，分别置于EP管4℃冷藏备用，并保持干燥；（2）授粉：3月份，取出储存的花粉，室温放置一小时使其恢复常温；按照花粉：超纯水= 1：1000 的重量比例配置成花粉液，按照南方红豆杉花粉授粉曼地亚雌株，曼地亚红豆杉花粉授粉南方红豆杉雌株，分别喷施雌株，每隔四天使用喷壶喷施一次，共授粉3次；（3）施肥：授粉后，按照氮、磷、钾的重量比例为1:3:1，喷施3次叶面肥；（4）挂果：挂果后喷施营养液，营养液成分为：N200mg/L、P33mg/L、 K66mg/L，磷肥以NH4H2PO4 形式加入，钾肥以KNO3形式加入，氮肥除以NH4H2PO4和KNO3的形式加入外，不足部分用（NH4）2SO4 补充；待种子成熟后，采集种子；（5）沙藏：将采集的种子冷水浸种5天，每天换水一次，浸种后将种子表面水分晾干，低温沙藏，按沙子：种子为3:1的重量比进行；（6）播种：春季，将沙藏的种子灭菌后，用300mg/L GA3+20mg/L 6‑BA +30mg/L KT+10mg/L ABT浸泡种子24小时，后播种，获得无菌试管苗；（7）移栽：将无菌试管苗炼苗10～15天，然后将其取出，洗净根部的培养基，将其根部浸泡在复合微生物制剂中30min，促进红豆杉植株新根的生长；所述复合微生物制剂包括以下重量配比的原料：假丝酵母菌发酵液：产黄纤维单胞菌发酵液：枯草芽孢杆菌发酵液：赤霉素：活性炭：磷酸氢二钠＝5：3：1：2：1：1；所述假丝酵母菌为假丝酵母菌（Candida utilis）ATCC No.22023;所述产黄纤维单胞菌为产黄纤维单胞菌（cellulomonas flavigena）ATCC No.482所述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CGMCC No：0954；所述复合微生物制剂的制备方法为：首先将假丝酵母菌、产黄纤维单胞菌、枯草芽孢杆菌分别按照常规方式活化，然后培养至菌液中活菌数达到108个/克获得发酵液，将上述发酵液按照质量比例5：3：1混合，按照重量配比添加活性炭、赤霉素和磷酸氢二钠即得。