[发明专利]一种红豆杉的杂交育种方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物的杂交育种方法，具体涉及一种红豆杉的杂交育种方法，属于木本植物品种选育的技术领域。

背景技术

红豆杉，又称紫杉，属国家一级保护的珍贵树种，天然林资源已枯竭。红豆杉是常绿乔木，树干通直，树姿优美，种子成熟时呈红色，假皮鲜艳夺目，是优良的盆景和绿化树种。红豆杉木材坚固耐用，纹理秀丽，根、茎都是高档的雕刻材料，是属于特种用林材；它的根、茎、皮、叶均含有紫杉醇，是当今世界公认的治癌药物，叶可通经、利尿、降血压，对防治糖尿病及心血管疾病有明显效果，是价值昂贵的药用林。近年红豆杉盆景在花木市场也呼之欲出，成为令人瞩目的新贵。红豆杉盆景放在室内具有明显的驱赶蚊虫和净化空气的效果，它吸收二氧化碳、一氧化碳、尼古丁、二氧化硫等有害物质，还能吸收甲醛、苯、甲苯、二甲苯等致癌物质，呼出氧气，起到防癌抗癌保健和净化空气作用，是家庭居室、酒店、宾馆及办公场所美化环境的珍贵植物。

红豆杉属植物，雌雄异株，雄球花单生于叶腋，雌球花的胚珠单生于花轴上部侧生短轴的顶端，基部有圆盘状假种皮，假种皮杯状，红色。本属树种为浅根植物，其主根不明显、侧根发达，耐荫性强，耐修剪、耐寒、耐病虫害，在天然林中生长缓慢，分布星散，野生树木日渐减少，是世界上公认的濒临灭绝的天然珍稀抗癌植物。由于红豆杉属植物不同种之间雄花的花期不同，且同种红豆杉的雌雄株花期不同步，造成授粉困难，严重影响了红豆杉属植物的杂交育种进程。

杂交育种对红豆杉的开发和推广利用都具有着非常重要的意义。

发明内容

本发明解决的技术问题是提供了一种红豆杉的杂交育种方法，解决红豆杉属植株种间花期不同步导致授粉育种困难的问题。

为了达到上述目的，本发明提供了一种红豆杉的杂交育种方法，包括如下步骤：

（1）花粉采集：于2月份，分别采集南方红豆杉（Taxus wallichiana var. mairei）和曼地亚红豆杉（Taxus × media）的雄株的花粉，自然干燥，剔除杂质后，分别置于EP管4℃冷藏备用，并保持干燥；

（2）授粉：到3月份，雌株进入吐水期，取出储存的花粉，室温放置一小时使其恢复常温；按照花粉：超纯水= 1:1000 的重量比例配置成花粉液，按照南方红豆杉花粉授粉曼地亚雌株，曼地亚红豆杉花粉授粉南方红豆杉雌株，分别喷施雌株，每隔四天使用喷壶喷施一次，共授粉3次；单株处理可采用灭菌棉签沾花粉涂抹吐水期雌花进行授粉；授粉后所有授粉植株进行分株隔离以防止外来花粉的干扰。

（3）施肥：授粉后，施肥，按照氮、磷、钾比例为1:3:1，喷施3次叶面肥；

（4）挂果：挂果后喷施营养液，营养液成分为：N200mg/L、P33mg/L、 K66mg/L，磷肥以NH₄H₂PO₄ 形式加入，钾肥以KNO₃形式加入，氮肥除以NH₄H₂PO₄和KNO₃的形式加入外，不足部分用（NH₄）₂SO₄ 补充。

保证植株养分供给；待种子成熟后，分别从母本植株上采集不同父本授粉育种种子，获得纯种和杂交种种子；

（5）沙藏：将采集的种子冷水浸种5天，每天换水一次，浸种后将种子表面水分晾干，低温沙藏，按沙子：种子3:1进行；

（6）播种：春季，将沙藏的种子灭菌后，进行激素浸种，用300mg/L GA₃+20mg/L 6-BA +30mg/LKT+10mg/LABT浸泡种子24小时，后播种，获得无菌试管苗。

（7）移栽：将无菌试管苗自然光遮光度下炼苗10～15天，然后将其取出，洗净根部的培养基，将其根部浸泡在复合微生物制剂中，30min，促进红豆杉植株新根的生长；

所述复合微生物制剂包括以下重量配比的原料：假丝酵母菌发酵液：产黄纤维单胞菌发酵液：枯草芽孢杆菌发酵液：赤霉素：活性炭：磷酸氢二钠＝5：3：1：2：1：1；

所述假丝酵母菌具体为假丝酵母菌（Candida utilis）ATCC No.22023;

所述产黄纤维单胞菌具体为产黄纤维单胞菌（cellulomonas flavigena）ATCC No.482

所述枯草芽孢杆菌具体为枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）CGMCC No：0954（参见CN1554744）；