[发明专利]肿瘤抗原靶向性DC细胞的制备方法在审
申请号: | 201610003131.4 | 申请日: | 2016-01-04 |
公开(公告)号: | CN105483084A | 公开(公告)日: | 2016-04-13 |
发明(设计)人: | 谢志明;武宁;郑蓉蓉;熊青卉;杨春辉 | 申请(专利权)人: | 英普乐孚生物技术(上海)有限公司 |
主分类号: | C12N5/0784 | 分类号: | C12N5/0784;C12N5/0783;A61K35/15;A61P35/00 |
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地址: | 200030 上海市浦东*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及一种肿瘤抗原靶向性DC细胞的制备方法,利用抗体能分别与肿瘤抗原和DC细胞表面FC受体结合的特性,DC细胞就能通过抗体特异性地摄取肿瘤细胞碎片,从而实现对肿瘤细胞特异性抗原的摄取和递呈。与DC细胞直接与肿瘤细胞裂解物共孵育的方法相比,这种方法对肿瘤细胞抗原的摄取具有特异性,效率更高,从而诱导出更强更多的肿瘤杀伤性淋巴细胞。 | ||
搜索关键词: | 肿瘤 抗原 靶向 dc 细胞 制备 方法 | ||
【主权项】:
肿瘤抗原靶向性DC细胞的制备方法,其特征在于,包括下述步骤:步骤一,取新鲜手术切除的肿瘤组织,剪碎,研磨,过滤,反复冻融,离心,将肿瘤组织制备成肿瘤组织裂解物;步骤二,从肿瘤患者的外周血获取外周血单个核细胞(PBMC),使用Ficoll淋巴细胞分离液分离PBMC,取贴壁细胞用于培养DC细胞,加入含GM‑CSF、IL‑4和自体血浆的无血清培养基培养;步骤三,DC细胞通过抗体摄取抗原,具体步骤为:DC细胞培养的第0‑5天,加入抗体与DC细胞结合,去除未结合的抗体后添加GM‑CSF、IL‑4和肿瘤组织裂解物;步骤四,24小时后加入DC细胞促成熟剂(含10ng/ml LPS,500IU/ml TNFa)和2%自体血浆促进DC细胞的成熟;步骤五,24小时后生理盐水洗涤收集DC细胞。
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